摘要:实验室应基于患者风险设计实施QC计划。本研究介绍了三种不同类型的质控方法,探索建立一种复合质控策略,用于室内及室间质量监控。基于患者数据的质控监控方式的引入,更好的解决了分析批稳定性监控问题,更适合现代医学实验室质量管理。复合质控策略的转化将成为实验室转化医学及患者关怀的典型范例。

摘要:目的 分析组蛋白去甲基化酶 (KDM2B)对卵巢癌细胞骨架排列中的调控作用，并探讨KDM2B作用的可能分子机制。方法 以人卵巢癌细胞系HO8910为研究模型，采用慢病毒pLKO.1-puro-shRNA 表达系统建立KDM2B稳定敲减细胞系（KDM2B敲减组）；采用KDM2B慢病毒质粒包装慢病毒，并感染上述人卵巢癌细胞，建立 KDM2B过表达细胞系（KDM2B过表达组），以感染慢病毒空载组的HO8910细胞作为对照组。RT-qPCR和western blot检测各组KDM2B mRNA及蛋白质的表达水平；F-actin荧光染色法检测卵巢癌细胞骨架排列变化；对照组及KDM2B敲减组进行转录组测序分析；RT-qPCR检测黏着斑激酶（FAK）通路上游基因ITGB1、ITGA6 mRNA的表达水平；免疫荧光试验检测FAK蛋白的表达水平；使用GEPIA肿瘤数据库分析FAK在卵巢癌组织样本中的表达水平，并分析FAK与KDM2B的相关性。结果 RT-qPCR结果证实，与对照组相比，KDM2B敲减组KDM2B mRNA水平降低，KDM2B过表达组KDM2B mRNA水平升高，差异有统计学意义 (P<0.05)；western blot结果表明，与对照组相比，KDM2B敲减组KDM2B蛋白的表达水平下降，KDM2B过表达组KDM2B蛋白水平上升，差异具有统计学意义(P<0.05)。F-actin荧光染色法结果证实，与对照组相比，KDM2B过表达组F-actin的表达量增加，且排列显示相同且规则的方向，而KDM2B敲减组 F-actin的表达量降低，且排列无序。转录组测序结果表明，KDM2B调控FAK信号通路。GEPIA数据库分析结果显示，FAK在卵巢癌组织中表达升高，且与KDM2B呈正相关（r=0.37, P<0.01）。结论 KDM2B促进F-actin的表达，使卵巢癌细胞骨架排列更加规则有序，其作用机制与FAK通路激活有关。

摘要:目的：分析并筛选HBV相关肝脏纤维化患者血清中差异表达miRNA。方法：选择2019年3月至2020年3月进入我院确诊为肝纤维化S2~S3期患者10例,以10例健康人作为对照,以血清作为研究样本。采用Illumina miRNA深度测序分析血清miRNA的表达。比较两组间差异表达的miRNA,对序列读数进行分析,以评估统计学意义。采用R平台进行分层聚类分析,以发现肝纤维化特异性表达的候选miRNA。采用qRT-PCR验证候选miRNA在各组中的表达,采用2-ΔΔCT分析miRNA的相对表达量。预测差异表达miRNA的靶基因,对靶基因进行GO分析。结果：在肝纤维化组和健康组之间,共筛选出78个表达具有显著性差异的miRNA。与健康组相比,肝纤维化组中表达上调的miRNA有30个,表达下调的miRNA有23个。其中,miR-505-3p、miR-197-3p、miR-500a-3p和miR-139-5p下调水平最高,miR-1273g-5p、miR-33a-5p 、miR-3960上调水平最高。选择表达变化最显著的miRNA进行qRT-PCR验证,结果与Illumina miRNA测序结果一致。结论：肝纤维化患者血清中miRNA的表达具有特异性,表达差异显著的miRNA有望成为新的肝纤维化临床诊断标志物。

摘要:目的 应用权重基因共表达网络分析(Weighted Gene Co-expression Network Analysis, WGCNA)方法筛选新生儿脓毒症无休克和休克关键基因。方法 基因表达数据库（Gene Expression Omnibus, GEO）下载新生儿脓毒症相关的表达矩阵GSE119217，WGCNA输出模块基因，Limma包筛选新生儿脓毒症无休克和休克差异表达基因（Differentially expressed genes，DEGs），进行基因本体(Gene Ontology, GO)和生物学通路分析(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)；确定并检测关键（hub）基因水平。结果 WGCNA分析确定与无休克脓毒症患儿显著相关的棕色模块和与休克脓毒症患儿显著相关的黄色模块；无休克脓毒症患儿的41个DEGs和休克脓毒症患儿的109个DEGs主要富集于中性粒细胞脱粒，中性粒细胞活化参与的免疫反应和中性粒细胞激活等反应，参与调控NOD样受体信号通路；实时定量PCR（qRT-PCR）结果表明无休克脓毒症患儿8个hub基因（AIM2，CARD17，CMPK2，IFI44，IFI44L，LAP3，RTP4和SERPING1）和休克脓毒症患儿2个hub基因（AHSP和HBD）均高表达。结论 基于生物学信息学分析，本研究确定了有无休克脓毒症患儿hub基因的表达水平，明确了中性粒细胞在脓毒症中的重要调控作用。

摘要:目的 应用权重基因共表达网络分析(Weighted Gene Co-expression Network Analysis, WGCNA)方法筛选新生儿脓毒症无休克和休克关键基因。方法 基因表达数据库（Gene Expression Omnibus, GEO）下载新生儿脓毒症相关的表达矩阵GSE119217，WGCNA输出模块基因，Limma包筛选新生儿脓毒症无休克和休克差异表达基因（Differentially expressed genes，DEGs），进行基因本体(Gene Ontology, GO)和生物学通路分析(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)；确定并检测关键（hub）基因水平。结果 WGCNA分析确定与无休克脓毒症患儿显著相关的棕色模块和与休克脓毒症患儿显著相关的黄色模块；无休克脓毒症患儿的41个DEGs和休克脓毒症患儿的109个DEGs主要富集于中性粒细胞脱粒，中性粒细胞活化参与的免疫反应和中性粒细胞激活等反应，参与调控NOD样受体信号通路；实时定量PCR（qRT-PCR）结果表明无休克脓毒症患儿8个hub基因（AIM2，CARD17，CMPK2，IFI44，IFI44L，LAP3，RTP4和SERPING1）和休克脓毒症患儿2个hub基因（AHSP和HBD）均高表达。结论 基于生物学信息学分析，本研究确定了有无休克脓毒症患儿hub基因的表达水平，明确了中性粒细胞在脓毒症中的重要调控作用。

摘要:目的 应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）技术建立乳腺癌诊断预测模型，寻找乳腺癌血清中的差异蛋白质/多肽，鉴别区分三阴性乳腺癌（TNBC）与非三阴性乳腺癌（NTNBC）。方法 研究纳入61例乳腺癌患者、60例乳腺纤维腺瘤患者及44例健康体检者。按照 3∶1的比例随机分为训练组(乳腺癌患者 45 例，健康体检者对照 33 例)和验证组(乳腺癌患者 16 例，健康人对照 11 例)。弱阳离子交换磁珠（WCX-MB）提取血清蛋白质/肽后，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）技术检测并筛选出差异峰，构建诊断预测模型并初步验证。观察分析乳腺癌患者血清蛋白质谱分子变化。结果 ClinProTools软件提供了乳腺癌组与健康组的诊断预测模型。遗传算法（GA）模型的特异度为90.9%，敏感度为93.8%，准确度为92.6%。对纤维腺瘤组和对照组、乳腺癌组和纤维腺瘤组以及TNBC组和NTNBC组分别进行聚类分析，发现有显著差异峰可将其准确区分：差异峰m/z 4220.9、5920.36在纤维腺瘤组中的峰强度明显高于对照组，但其在乳腺癌组中的峰强度明显低于纤维腺瘤组；差异峰m/z 4220.9、5920.36在TNBC组中的峰强度明显高于NTNBC组。结论 应用MALDI-TOF-MS技术建立的乳腺癌诊断预测模型具有高敏感性、高特异性的特点，此技术可将乳腺癌患者从健康体检者和良性疾病人群中区分出来，还可用于区分乳腺癌的基因分型。

摘要:目的 探讨基于血清甲胎蛋白（AFP）、甲胎蛋白异质体(AFP-L3)、异常凝血酶原（DCP）水平的中国GALAD（C-GALAD）评分系统在肝细胞肝癌（HCC）诊断中的应用价值。方法 选取2019年6月至2020年6月在郑州人民医院治疗的HCC患者98例作为HCC组，并根据TNM分期分为Ⅰ/Ⅱ组和Ⅲ/Ⅳ组；选取同期接受治疗的肝炎及肝硬化患者90例作为肝病组及同期体检的健康者50例作为对照组。检测各组研究对象血清中AFP、AFP-L3、DCP水平及计算C-GALAD评分，ROC曲线分析C-GALAD评分及AFP、AFP-L3、DCP对肝癌的诊断价值。结果 HCC组、肝病组AFP、AFP-L3、DCP水平、C-GALAD评分及阳性率显著高于对照组，且HCC组均显著高于肝病组（P＜0.05）；C-GALAD评分定性诊断肝癌的灵敏度、特异度及准确性均显著高于单独AFP、AFP-L3、DCP指标（P＜0.05）；ROC曲线分析显示C-GALAD评分定量鉴别肝癌与肝病、肝癌与非肝癌的曲线下面积均高于单独AFP、AFP-L3、DCP指标；Ⅲ/Ⅳ组患者血清AFP、AFP-L3、DCP水平及C-GALAD评分均显著高于Ⅰ/Ⅱ组（P＜0.05），且C-GALAD评分诊断HCC病理分期的曲线下面积高于单独AFP、AFP-L3、DCP指标。结论 C-GALAD评分可用于HCC的鉴别诊断，其性能优于单独AFP、AFP-L3、DCP指标。

摘要:目的：探讨HRT围绝经期患者血清AMH、抗β2 糖蛋白1抗体（抗β2GP1）、PC、PS水平的变化及临床意义。方法：收集围绝经期患者，行HRT者60例(观察组)，未行HRT者(对照组)，观察组以BMI分＜28kg/m2组(A组)和≥28kg/m2组(B组)，分析各组间治疗前和治疗3、6个月及1年时AMH、抗β2GP1、PC、PS差异。结果：随着治疗时间的延长，观察组AMH、抗β2GP1逐渐升高，PC、PS逐渐下降 (P＜0.05)；治疗6个月、1年时，观察组AMH、抗β2GP1明显高于对照组，PC、PS明显低于对照组(P＜0.05)。A、B组AMH、抗β2GP1随着治疗时间延长而逐渐升高，PC、PS逐渐下降；治疗6个月、1年时，A组和B组血清AMH比较差异无统计学意义(P＞0.05)，B组β2GP1明显高于A组，PC、PS明显低于A组(P＜0.05)。结论：HRT围绝经期患者随治疗时间延长，AMH逐渐升高，卵巢功能得到改善，延缓卵巢衰退，且不受BMI的影响；抗β2GP1逐渐升高，PC、PS逐渐下降（BMI≥28kg/m2更甚）明显，其血栓风险形成增加，BMI ≥ 28kg/m2者更甚。通过动态检测以上指标，对评估HRT的疗效及安全性具有较高的临床应用价值。

摘要:目的 探讨结核性溃疡患者血浆中趋化因子(C-X-C基序)配体9（C-X-C motif chemokine 9；CXCL9）、趋化因子(C-X-C基序)配体10（C-X-C motif chemokine 10；CXCL10）的临床价值。方法 收集南京市中西医结合医院结核性溃疡患者108例作为结核性溃疡组，非结核性溃疡患者27例及健康人36例作为对照组。用定量逆转录PCR（quantitative reverse transcription PCR, RT-qPCR）法检测两组血浆中CXCL9、CXCL10 mRNA的表达水平，绘制ROC曲线，及灵敏度、特异度进行分析。结果 与对照组相比，结核性溃疡患者的CXCL9、CXCL10明显升高（P<0.01）；CXCL9的ROC曲线下AUC值为0.938，CUT OFF值为0.815时，灵敏度为87.96％，特异度为90.48％；CXCL10的AUC值为0.915，CUT OFF值为4.425时，灵敏度为91.67％，特异度为79.37％；CXCL9和CXCL10联合检测，灵敏度为94.44%，特异度为84.13%。结论 CXCL9和CXCL10可以高度准确地区分非结核性溃疡与结核性溃疡疾病，为结核性溃疡的诊断和特异性诊断标志物的选择提供了相应的参考。

摘要:目的：探讨胃癌患者负性共刺激分子T细胞活化的V结构域Ig抑制因子（V-domain immunoglobulin suppressor of T cell activation, VISTA）的表达与病理特征及预后的关系。方法：收集2011年1月至2012年12月在苏州大学附属第一医院接受胃癌手术的268例胃癌患者肿瘤组织并制作成组织芯片；免疫组化染色检测VISTA、浸润细胞标记物、γ干扰素（IFN-γ）的表达水平；采用荧光定量 PCR检测胃癌和胃炎组织中VISTA mRNA表达；ELISA法检测血清IFN-γ的表达水平；进一步分析VISTA与IFN-γ、临床病理参数之间的相关性，以及对患者预后的影响。结果：VISTA主要在肿瘤浸润免疫细胞（122/268，45.5%）和间质细胞（148/268，55.2%）中表达，较少在肿瘤细胞中则表达（14/268，5.2%）。VISTA与IFN-γ的表达呈正相关（P<0.05）。胃癌组织VISTA mRNA和蛋白表达显著高于胃炎组织（P<0.05），且其高表达与患者性别、肿瘤分期以及是否淋巴结转移之间有显著相关性（P均<0.05）。VISTA低表达是影响胃癌总生存率的危险因素（P=0.035）。结论：VISTA具有作为胃癌与胃炎鉴别诊断指标的潜能， 或可作为胃癌患者风险因素的预后标志物，但需联合肿瘤微环境中其他指标进行综合分析才能更精准预测患者预后。

摘要:目的探讨甘胆酸(CG) 、胆红素、氨基转移酶等临床肝脏相关指标单独及联合检测在不同类型肝脏疾病中的临床应用价值。方法收集2017年1月至2018年5月苏州市第五人民医院就诊的250例肝病患者作为疾病组，其中慢性重型乙型病毒性肝炎患者95例,自身免疫性肝炎患者48例,急性黄疸型病毒性肝炎患者68例,戊型病毒性肝炎胆汁淤积型患者39例， 另收集健康人对照组50例。采集各组静脉血标本，分离血清及血浆,并检测总胆汁酸(TBA) CG、总胆红素(T-Bil)、天门冬氨酸氨基转移酶( AST)、丙氨酸氨基转移酶( ALT)、清蛋白(Alb)、纤维蛋白原(Fg)的表达水平。GC指标与其他指标的相关性分析采用Spearman分析, ROC曲线评估各指标单独及联合检测筛查病毒性肝病的临床价值。结果CG 、TBA、T-Bil. AST、ALT、Alb和Fg指标水平在各组间的差异均有统计学意义(P<0.05)。T-Bil 在慢性重型乙型病毒性肝炎组中的表达水平最高,TBA在戊型病毒性肝炎胆汁淤积型组中的表达水平最高,AST和ALT在自身免疫性肝炎组中的表达水平最高。CG水平在慢性重型乙型病毒性肝炎组中与TBA相关性最高(r=0.784),在自身免疫性肝炎组中与T-Bil水平相关性最高(r=0.597),在急性黄痘型病毒性肝炎组中与T-Bil 水平相关性最高(r=0.638),在戊型病毒性肝炎胆汁淤积型患者组中与TBA水平相关性最高(r=0.762)。CG、TBA、T-Bil、AST、ALT单独及TBA、CG、T-Bil三者联合检测筛查病毒性肝病的AUCROC分别为0.697( 0.638~0.756)、0.901 (0.865 ~0.937)、0.693(0.634-0.752)、0.652(0.590~0.714)、0.626( 0.563~ 0.689)和0.994(0.990 ~0.999),敏感性分别为44.0% 、78.4% .44.8%、36.6% .35.1%和89.6%,特异性分别为74.4% .88.0% .75.3%、72. 1% .72.3%和100%。结论对于肝脏疾病患者进行CG、TBA、T-Bil、AST、ALT、Alb和Fg单独及联合检测有望用于评估肝脏疾病的种类及严重程度。

摘要:目的探讨脊髓损伤患 者血清神经营养因子、炎症因子及B淋巴细胞瘤-2基因(Becl-2)/Bel-2相关的X基因( Bax)相关蛋白表达水平的变化及临床意义。方法选择 2016年4月至2019年6月南京市第一医院就诊的48例脊髓损伤患者作为研究对象,根据神经功能分级将其分为完全损伤组(n=21)和不完全损伤组(n=27),另收集同期体检健康者30例作为健康人对照组。采用ELISA法检测并比较各组患者在脊髓损伤1.3.7 d后血清神经营养因子、炎症因子IL-6、TNF-a以及血清Bel-2 、Bax表达水平的变化。结果3 组受试者在脊髓损伤1.3.7 d后血清脑源性神经营养因子( BDNF)、神经营养因子3(NT-3)、Bcl-2的表达水平依次降低,而血清Bax的表达水平逐渐升高,且血清BDNF、NT-3、NT-4、,Bcl-2在完全损伤组、不完全损伤组以及健康人对照组中的表达水平依次下降,而血清Bax在3组中的表达水平依次升高(P<0.05)。完全损伤组、不完全损伤组患者血清IL-6、TNF-a水平在脊髓损伤1d后升高,脊髓损伤3d后达到峰值(P<0.05)。结论急性脊髓损伤 患者血清神经营养因子、炎症因子及Bax/Bcl-2水平均显著升高,其水平变化或可作为临床判断脊髓损伤程度的指标。

摘要:胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1, IGF-1)是一种在分子结构上与胰岛素类似的多肽物质，是人体内干细胞、肾细胞、脾细胞等几十种细胞自分泌和旁分泌的产物。研究者采用PCR检测IGF-1 mRNA水平，流式细胞术分析其表达水平等证实IGF-1与甲状腺相关性眼病发病机制密切相关，并证实可以通过抑制胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)从而治疗甲状腺相关性眼病(thyroid associated ophthalmopathy, TAO)。该文主要对IGF-1受体检测在甲状腺相关性眼病中的意义进行综述。

摘要:目的：基于癌症基因图谱(The Cancer Genome Atlas, TCGA)数据库分析APC2基因的表达水平在结肠癌患者中的诊断及预后价值。方法：从TCGA数据库中下载所有结肠腺癌(colon adenocarcinoma,COAD)病例APC2基因的RNA-Seq转录组数据以及对应的每个患者的临床参数,分析APC2基因的表达水平和结肠癌临床病理特征以及预后的关系,并利用String在线分析工具寻找与APC2相互作用的蛋白网络。结果：APC2在COAD组织中的表达量低于41例癌旁正常组织中APC2的表达量(0.87±0.42 vs 1.11±0.22, P<0.05)；受试者曲线显示APC2基因对COAD有较好的诊断价值(AUC=0.7391,95%CI=0.6855~0.7926,P<0.0001)；APC2基因的表达与COAD的淋巴结转移、TNM分期以及最终生存结局密切相关(P<0.05)；APC2低表达的COAD患者总体生存时间长于APC2高表达的患者(P<0.05)；CDC16,CDC23,CDC27,ANAPC15与APC2的作用密切相关。结论：APC2基因在COAD组织中呈表达下调,并与疾病的进展以及预后密切相关,有潜力成为结肠癌诊断、预后评估以及靶向治疗的新型生物学标志物。

摘要:目的 利用患者历史对比数据,建立基于机器学习中SVM算法识别临床混淆样本的方法,并通过与RCV方法比较,验证该方法的临床有效性。方法 从北京朝阳医院采集的22项血液常规检测结果,经过数据清洗过滤,筛选合格的患者只保留两次检验结果,两次结果按所有项目对应计算dalta值,用同一患者与不同患者的delta值分别制作正配样本与错配样本。dalta值类型分绝对值与相对值两种。采用SVM分类算法实现用多项目识别两种样本,与基于单项目识别的RCV方法作比较。探讨利用SVM算法识别混淆样本技术在临床的可行性。结果 SVM算法通过22项指标识别正配和错配两种样本,经过网格搜索法寻取最佳参数,精确度达到了0.92。基于统计学的RCV方法在不同项目下效果不同,其中MCH在绝对值delta下的准确度最高,为0.8145。结论 基于多项目的SVM算法在混淆样本的识别上准确度更高,性能优于传统方法,适合在临床上普及应用。

摘要:目的 利用机器学习随机森林（random forest，RF）算法，建立一种准确识别检测小偏移的实时质控方法，并以移动异常值之和的方法（Moving sum of outlier，MovSO）作为参比方法，评价新算法效能。 方法 收集来自航空总医院实验室信息系统导出的2016年1月至2021年8月在罗氏化学发光E601设备检测的hs-cTnT项目检测结果，按照规定的数据清洗规则筛选出54243个结果作为无偏数据，人为引入10个不同大小的偏移，生成相应的有偏数据，每种偏移下用RF与MovSO两种算法进行实验。采用分类模型标准及临床指标对算法进行评价。 结果 RF算法在步长为10时，对10个小偏移均能检出，FPR在4.0% ~ 4.7%，MNPed在12以下。除了在±1ng/L偏移时准确度为85%，其余8个偏移检出准确度均在90%以上；MovSO算法的最优步长为200，除了在1ng/L时偏移无法检出，对其他9个偏移可检出，FPR在3.5% ~ 4.6%之间，MNPed均在100以上，仅在5ng/L偏移时，识别准确度方可达89%。RF算法总体显著优于MovSO，RF可准确识别hs-cTnT的测量小偏移。 结论 基于机器学习算法建立的质控方法可以改进类似hs-cTnT等临床对检测质量要求较高的项目的测量准确度，为实验室质控方案提供了新思路。