摘要:摘要：感染性疾病是威胁人类生命健康的主要疾病，病原学诊断是感染性疾病诊治的关键环节。近年来，宏基因组二代测序技术(mNGS)迅速发展。与传统病原学检测技术相比，mNGS能无偏倚性直接分析出标本中的病原体谱、丰度和分布情况，改变传统病原学诊断模式，具有良好的应用前景。该文对mNGS在病原体检测、感染性疾病诊断、检测影响因素和结果判读等方面进行评述，并对存在问题和未来发展进行总结，以期促进mNGS技术合理应用。

摘要:摘要：通过宏基因组二代测序(metagenomic next-generation sequencing，mNGS)技术确认病原微生物已成为新发、突发、罕见及常规检测阴性的感染性疾病诊断的重要手段，这项技术提高了临床对感染性疾病的认识，成为精准诊疗的重要驱动力。该文就mNGS在临床应用中的问题展开讨论。

摘要:摘要：目的?应用环介导等温扩增技术(LAMP)检测下呼吸道感染患者标本中的13种病原体，为临床快速诊断感染性疾病提供依据。方法?收集疑似下呼吸道感染患者痰标本103例、肺泡灌洗液45例，常规培养分离细菌、真菌，用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)进行细菌鉴定，同时采用LAMP技术检测13种常见病原体(肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌、流感嗜血杆菌、嗜肺军团菌、肺炎衣原体、肺炎支原体、结核分枝杆菌复合群)，实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测45例肺泡灌洗液标本中肺炎支原体，LAMP法检出的结核分枝杆菌阳性标本用二代测序(NGS)技术验证。结果?148例标本中，质谱法检出率为42.6%(63/148)，分离出病原菌81株；LAMP法检出率为68.2%(101/148)，共检测出175种病原体。质谱法和LAMP法对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌的检出率差异无统计学意义(P>0.05)，但LAMP法对肺炎链球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、流感嗜血杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌的检出率高于质谱法(P<0.05)。LAMP法从45例肺泡灌洗液中检出26例肺炎支原体，而采用RT-qPCR检出23例。148例样本中，LAMP法检出2例结核分枝杆菌复合群，并使用NGS验证为阳性。结论?与传统细菌培养鉴定相比，LAMP技术具有检测快速、准确、操作简便等优势，可为临床诊疗提供可靠依据。

摘要:摘要：目的?评价GeneXpert实时荧光定量PCR法在诊断艰难梭菌感染中的应用价值。方法?收集住院腹泻患者非重复粪便标本296份，同时进行GeneXpert试验和产毒素培养(toxigenic culture, TC)。TC包括厌氧培养、菌株基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)鉴定、PCR扩增艰难梭菌毒素基因。以TC结果为参考，评价GeneXpert试验的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值，并评价GeneXpert试验和TC 2种方法结果的一致性。结果?GeneXpert试验的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为98.5%、92.6%、91.7%和98.7%。GeneXpert试验与TC一致性好(Kappa=0.905)。GeneXpert试验报告2株RT027型高毒力菌株，经核糖体分型确证为RT027型艰难梭菌。结论?GeneXpert实时荧光定量PCR可快速、准确检测粪便标本中的艰难梭菌毒素基因，且可报告高毒力RT027型菌株，具有重要的临床应用价值。

摘要:摘要：目的?建立一种基于实时荧光PCR解链曲线技术的希特林蛋白缺乏症基因的快速分型方法。方法?以SLC25A13基因c.851-854delGTAT、c.1638-1660dup23、IVS6+5G>A等常见突变为靶点，设计特异性引物及探针，建立基于实时荧光PCR解链曲线分析的希特林蛋白缺乏症快速基因分型方法；盲法编号后用所建立的方法检测40例已知基因型血斑标本，评价其敏感性与特异性。结果?各目标位点的野生型和突变型均有其特异性解链Tm值，解链曲线结果图直观且易于判读；40例标本的检测结果与靶基因型结果相符，即敏感性和特异性均为100%。结论?建立了一种希特林蛋白缺乏症靶基因位点快速基因分型方法，简单实用，准确稳定，可作为当前希特林蛋白缺乏症SLC25A13基因常规分子诊断及人群分子筛查的适用方法。

摘要:摘要：目的?通过联合运用Triton X-100和多聚甲醛(PFA)处理玻片，改善血液肿瘤骨髓标本荧光原位杂交(FISH)检测质量。方法?42例血液肿瘤患者骨髓标本玻片，在常规FISH流程中，实验组增加Triton X-100/4% PFA预处理步骤，对照组按照常规步骤进行。配对比较实验组与对照组中未见杂交信号细胞数和阳性细胞比例。当实验组与对照组结果不一致时，骨髓增生异常综合征(MDS)标本通过扩大计数范围验证准确性，多发性骨髓瘤(MM)标本采用荧光免疫表型结合间期原位杂交(FICTION)检测验证准确性。结果?与对照组相比，实验组杂交区域非特异性荧光信号减少，背景干净，细胞核内探针信号更清晰，FISH检测成功率达100%。实验组中未见杂交信号的细胞比例为(4.30±3.30)%，对照组为(8.04±5.45)%，二者配对差值(实验组-对照组)为(-3.74±4.27)%，实验组未见杂交信号的细胞比例低于对照组(P<0.001)。实验组与对照组判读结果一致的132个信号位点中，实验组的阳性细胞比例为(82.16±23.89)%，对照组为(77.10±23.56)%，二者配对差值(实验组-对照组)为(5.06±10.08)%，实验组阳性细胞比例高于对照组(P<0.001)。此外，实验组与对照组的判读结果不一致的5个检测位点，验证结果与实验组结果一致。结论?联合运用Triton X-100/4% PFA能够提高骨髓标本间期FISH检测成功率和阳性位点检出率。

摘要:摘要：目的?分析不同检测系统血肾素及醛固酮浓度结果一致性及对临床诊断的影响。方法?收集患者及健康成年人新鲜血浆标本，制备不同浓度肾素及醛固酮样品，经A、B、C或D检测系统检测，分析检测系统间结果的一致性，部分结果与液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)测定结果再比较分析。健康成年人标本经A和D系统检测，验证其一致性并建立参考区间。结果?血肾素和醛固酮浓度在4个系统间的Passing-Bablok分析示Y≠X，相关系数(r)分别为0.901～0.992和0.944～0.976，Bland-Altman分析平均偏差分别为-15.9～0.3 μIU/mL和-102.5～104.3 pg/mL，实验室间变异系数分别为1.85%～31.6%和1.98%～28.32%。醛固酮S6～S10与LC-MS/MS结果比较中，r为0.757～0.865，Bland-Altman分析平均偏差为-190.7～-61.3 pg/mL。健康成年人结果Passing-Bablok分析示Y≠X，Bland-Altman分析中95%点均在±1.96s线内。以P2.5～P97.5建立肾素及醛固酮的立位参考区间，A系统为1.95～68.27 μIU/mL和28.55～313.75 pg/mL，D系统为3.53～94.82 μIU/mL和14.5～311.05 pg/mL。结论?仅部分检测系统间血肾素及醛固酮浓度结果一致性较好，不同检测系统的结果一致性亟待提高，各实验室应注重建立诊断切点及参考区间。

摘要:摘要：目的?探讨血降钙素原(PCT)联合肌酐(Cr)对重症社区获得性肺炎(SCAP)患者并发急性肾损伤(AKI)的预测价值。方法?2015年1月至2019年7月哈尔滨医科大学附属第一医院重症监护室SCAP住院患者580例，根据是否发生AKI将SCAP患者分为AKI组(n=320)与非AKI组(n=260)，比较两组患者的人口学特征、基础疾病和实验室指标检测结果，并进行统计学分析。结果?与非AKI组患者相比，AKI组患者体温、住院死亡率更高，住院时间更长，Cr、Urea、UA和PCT水平更高(P均<0.05)。Logistic回归分析结果显示PCT、Cr和慢性肾脏疾病是SCAP患者发生AKI的独立影响因素(P均<0.05)。PCT、Cr预测SCAP并发AKI的AUCROC分别为0.613和0.654，PCT、Cr联合的AUCROC为0.672。进一步将SCAP患者分为青年组43例及中老年组537例，PCT、Cr预测青年组SCAP并发AKI的AUCROC分别为0.776、0.686，PCT、Cr联合的AUCROC为0.784；PCT、Cr预测中老年组SCAP并发AKI的AUCROC分别为0.605、0.653，PCT、Cr联合的AUCROC为0.668。结论?PCT、Cr和慢性肾脏疾病是SCAP患者AKI发生的独立影响因素，PCT联合Cr对SCAP患者AKI的发生具有一定的临床预测价值，且对青年SCAP患者的预测价值优于中老年SCAP患者。

摘要:摘要：目的?观察严重烧伤患者的血小板计数(PLT)变化趋势、红细胞分布宽度(RDW)/PLT比值(RPR)、中性粒细胞计数(N)/PLT比值(NPR)水平及其对预后的评估价值。方法?选取2017年1月至2019年8月杭州市江干区人民医院收治的烧伤面积大于总体表面积30%的患者101例作为研究对象，记录入院后PLT开始减少的时间、PLT达到最低值的时间及最低值平均数、首次切削痂的面积、手术治疗前及手术治疗后的PLT变化情况。于患者烧伤后第3天检测血常规，根据RDW、N、PLT计算RPR、NPR并进一步统计分析。结果?PLT开始降低时间为(3.13±0.74)d，PLT最低值出现时间为(6.68±0.51)d，PLT最低值为(204.55±17.26)×109/L，PLT平均在第(11.59±1.34)天开始恢复。Spearman秩相关性分析显示，PLT最低值与烧伤总面积、Ⅲ度烧伤面积呈负相关(相关系数为-0.304、-0.364，P均<0.05)；多元线性回归分析显示，烧伤面积越大、手术切削痂的面积越大、未使用生长激素均是PLT平均值降低的主要影响因素；应用Kaplan-Neier分析显示，烧伤后第3天RPR、NPR的高低数值与患者生存率相关。结论?烧伤后第3天RPR和NPR可作为严重烧伤患者预后判断的辅助指标。

摘要:摘要：表面等离激元共振成像(SPRi)技术是一种能够实时跟踪生物分子间相互作用的无标记技术，在传感器芯片表面固定血型相关抗体检测血型，监测和使用后表面可再生利用，可发展成为一种自动化血型检测系统。该技术可利用固相法固定相关抗体或者抗原，与微阵列芯片相结合来同时检测不同种类的红细胞抗原或者血小板抗体，使检测更具优势。该文简单介绍现行常用的血型检测方法，并总结基于SPRi技术的血型检测的研究进展。

摘要:摘要：目的?制定我国心肌标志物——心肌肌钙蛋白I(cTnI)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌红蛋白(Myo)、同型半胱氨酸(Hcy)的性能规范，包括允许总误差(TEa)、允许不精密度(Ia)和允许偏倚(Ba)。方法?根据米兰会议性能规范设定模式中的模式二(基于生物学变异)和模式三(基于当前技术水平)设定性能规范。结果?基于生物学变异推荐cTnI的TEa、Ia和Ba分别为27.91%(适当)、10.54%(最低)、10.52%；基于生物学变异推荐cTnT的TEa和Ia分别为24.47%(最佳)、15.30%(适当)；基于生物学变异推荐Myo的TEa、Ia和Ba分别为19.60%(适当)、10.43%(最低)、2.39%：基于当前技术水平推荐Hcy的TEa、Ia和Ba分别为20.00%、8.50%、5.98%。结论?制定了符合我国临床实验室当前检测水平的心肌标志物性能规范。

摘要:摘要：目的?利用临床血常规标本分离、富集血细胞，制备高浓度血细胞样品，用于血液分析仪线性范围的验证评价。方法?从多份临床新鲜血常规抗凝全血标本中分离、富集血细胞，制备高浓度血细胞样品，按照国家卫生行业标准WS/T 406—2012及WS/T 408—2012文件的要求，对Sysmex XN-350血液分析仪的线性范围进行验证。结果?混合多份临床血常规标本，通过分离富集血细胞可获得高浓度血细胞样品；对Sysmex XN-350血液分析仪线性验证数据进行多项回归分析显示，Hb与PLT为一阶线性，而RBC、HCT和WBC为临床可接受的二阶线性。RBC、Hb、HCT、WBC和PLT线性验证数据的不精密度计算值分别为0.73%、0.58%、0.84%、1.11%和1.39%，均小于判定界值9.76%，数据的精密度较好，可满足线性评价的要求；实际验证的线性范围分别为(0～8.35)×1012/L、0～260 g/L、0%～76.2%、(0～291.38)×109/L和(0～2 404)×109/L，可基本满足临床需求。结论?混合多份临床血常规标本通过分离、富集可获得高浓度血细胞样品，可用于血液分析仪线性范围的验证。

摘要:摘要：目的?探讨液相色谱串联质谱技术(LC-MS/MS)在载脂蛋白E(apoE)室间质量评价中的应用。方法?分别将5份混合人血清样品冷链运送到76家实验室，用免疫比浊法(ITA)进行单次检测。以同位素标记精氨酸的肽段为内标，对标本进行变性、烷基化和胰蛋白酶酶解处理，液相色谱部分采用SB-C18色谱柱分离，质谱部分采用正离子模式和多反应监测定量。JMP 13.0软件分析不同方法分组所对应的相对偏倚。结果?对于所有样品，ITA检测apoE的方法组内不精密度在1.7%至20.4%之间。总不精密度在8%左右(sB～sE样品)。5个样品相对偏倚的均值分别是(按照样品浓度由低到高排列)：-34.2%、-9.4%、-9.8%、-2.7%和-2.1%。高浓度样品比低浓度样品更接近LC-MS/MS检测结果。结论?LC-MS/MS检测apoE可评价免疫法的准确性，为临床应用提供帮助。

摘要:摘要：分析质控多规则误差检出概率产生的原理，通过使用电子表格EXCEL，计算常用多规则13s/22s、13s/2of32s、13s/22s/R4s、13s/2of32s/R4s、13s/22s/R4s/41s在不同系统误差大小时的误差检出概率，并绘制功效函数图及标准化操作过程规范图，帮助实验室进行室内质控方法个性化设计与应用。

摘要:摘要：目的?观察江苏扬州地区健康男性总前列腺抗原(tPSA)、游离前列腺抗原(fPSA)以及二者比值(fPSA/tPSA)随年龄的变化趋势，建立实验室的特异性参考区间。方法?收集2018年武警江苏总队医院健康体检男性3 402例，最终纳入分位数回归分析1 369例，收集tPSA、fPSA、fPSA/tPSA检测结果；利用R语言程序包分别拟合tPSA、fPSA、fPSA/tPSA的5%和95%分位点的回归模型，探索年龄因素对参考区间分布的影响，以10年为1个亚组建立不同年龄段的参考区间。结果?tPSA、fPSA、fPSA/tPSA结果呈明显的偏态分布，并存在年龄依赖性。tPSA和fPSA的参考区间上限值(95%分位点)在30～40岁最低，随后升高，呈“U”型分布；fPSA/tPSA的参考区间下限值(5%分位点)整体呈降低趋势。结论?分位数回归模型对于建立PSA等非正态分布检验指标的参考区间有良好的适用性，可通过分位数回归模型修正或完善试剂说明书所给的参考区间，按年龄等影响因素建立所在实验室的特异性参考区间。

摘要:摘要：目的?了解广州地区0～7岁儿童血清25羟维生素D[25(OH)D]营养状况。方法?选取2018年2月至2019年6月期间体检的2 418例0～7岁儿童为研究对象，采用液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)检测血清25(OH)D2和25(OH)D3浓度水平，分析性别、年龄、季节等对25(OH)D水平的影响。结果?25(OH)D缺乏组113例(占4.7%)，不足组534例(占22.1%)，处于较低水平的占26.8%；不同性别儿童的25(OH)D水平存在差异，男童25(OH)D水平高于女童，缺乏和不足所占比例低于女童(P<0.05)；25(OH)D水平随着年龄的增长呈下降趋势，3～4岁、4～5岁、5～6岁、6～7岁儿童血清25(OH)D缺乏和不足的比例高于0～1岁、1～2岁、2～3岁儿童(P<0.05)；不同季节，0～7岁儿童25(OH)D水平夏季最高，冬季最低，冬季25(OH)D缺乏比例高于其他季节，夏季25(OH)D缺乏和不足比例最低(P<0.05)：0～1岁儿童25(OH)D2检出率在7岁以下最高(P<0.05)，25(OH)D2可有效降低缺乏和不足比例。结论?0～7岁儿童25(OH)D水平与性别、年龄、季节有关，应加强对女童、3～6岁男女童及冬季期间补充维生素D，以满足机体需要。同时检测25(OH)D2和25(OH)D3有助于临床精准判断25(OH)D营养状况。

摘要:摘要：目的?观察健康人群尿液生化项目的日内变异、昼夜差异和性别差异。方法?2018年4月至5月招募北京地区健康志愿者41名，年龄(38±10)岁，其中男性18名，检测24 h内随机尿和总尿的生化结果，统计分析尿液生化项目的昼夜差异，比较经肌酐(Cr)校正前后日内变异系数(CV)的差异，分析性别间24 h尿生化项目的差异。结果?尿酸(UA)、总蛋白(Pro)、微量清蛋白(mAlb)、尿素(Urea)、钙(Ca)、磷(P)、钾(K)、钠(Na)、氯(Cl)各项目经Cr校正前、后CV(%)分别为：47.66±13.9和31.20±13.02、54.45±19.63和29.10±17.30、58.39±21.59和40.38±22.44、41.26±17.48和23.42±9.38、56.10±17.79和44.41±16.13、61.58±22.21和35.81±17.59、51.75±18.28和40.45±18.42、41.94±14.80和41.03±13.46、40.02±14.68和39.87±18.40。UA、Pro、mAlb、Urea、Ca、P、K经Cr校正后，CV均降低(P均<0.01)，而Na、Cl校正前、后CV差异无统计学意义(P均>0.05)；尿UA、Na、Cl、K、P有昼夜差异(P<0.01)，UA、Na、Cl、K白天排泄高于夜间，而P夜间排泄高于白天，Pro、mAlb、Urea、Ca无昼夜差异(P>0.05)；男性24 h尿Cr高于女性(P<0.01)，分别为(16.12±3.46)mmol/24 h，(11.38±2.35)mmol/24 h，而其他项目差异无统计学意义(P>0.05)。结论?尿液生化项目存在较大的日内变异，经Cr校正后部分项目日内变异减小，个别项目存在昼夜差异和性别差异。