• 2019年第10期文章目次
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    • >检验与临床
    • 沈阳市新诊断HIV感染者整合酶抑制剂原发耐药研究

      2019(10):721-725.

      摘要 (1149) HTML (0) PDF 2.63 M (466) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 明确沈阳市新诊断的HIV-1感染者整合酶抑制剂(Integrase inhibitors, InIs)耐药株的传播情况。方法 回顾性收集2018年6月至2019年3月沈阳市新诊断的HIV感染者80例,扩增血浆病毒RNA的整合酶编码基因,系统进化分析病毒基因型,以Stanford HIV耐药数据库解读耐药基因突变,计算原发耐药率并分析不同亚型毒株耐药相关自然多态性。结果 80例HIV-1感染者中共检出CRF01_AE感染者51例,占63.8%;CRF07_BC感染者14例,占17.5%,B亚型感染者6例,占7.5%;其他不典型重组9例,占11.3%。2例CRF01_AE感染者检出R263K突变,1例B亚型感染者检出E138A突变,耐药率3.8%。CRF01_AE感染者在整合酶耐药相关位点 50、74、119、153位氨基酸具有多态性,频率分别为5.9%、2.0%、13.7%和4.0%;而CRF07_BC感染者在在整合酶耐药相关位点50、74、157位上氨基酸具有多态性,频率均为7.1%。结论 沈阳市新诊断HIV感染者InIs原发耐药率较低,但少数感染者在整合酶耐药相关位点具有氨基酸多态性。需要加强整合酶耐药监测,并加强对我国常见HIV流行株的耐药基因型及表型研究,更好地解读耐药突变的意义。

    • >临床实验研究
    • 卵巢癌细胞促进外周血CD4+ T细胞糖酵解代谢

      2019(10):726-730.

      摘要 (1004) HTML (0) PDF 2.07 M (470) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 探讨卵巢癌细胞对外周血CD4+ T细胞糖酵解代谢及功能的影响。 方法 建立健康人CD4+ T细胞与卵巢癌细胞SKOV3共培养体系,检测共培养后CD4+ T细胞糖酵解相关8个基因(mTORC1,HIF1α,GLUT1,GPI,ENO1,PKM2,LDHα,PDK1)的mRNA表达水平,葡萄糖摄取和葡萄糖酵解水平,CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞的表达比例,以及CD4+ T细胞的增殖水平。并检测10例卵巢癌患者、10例卵巢良性肿瘤患者及10例健康对照者外周血CD4+ T细胞糖酵解相关8个基因的表达水平。 结果 与CD4+ T细胞单独培养组相比,SKOV3共培养组CD4+ T细胞中糖酵解相关8个基因的表达水平均升高(P均<0.01),葡萄糖摄取及葡萄糖酵解水平增高(P < 0.05),CD4+ CD25+ Foxp3+ T细胞的表达比例上升(P < 0.05),CD4+ T细胞增殖水平下降(P < 0.05)。此外,卵巢癌患者外周血CD4+ T细胞中糖酵解相关的8个基因的mRNA表达水平显著高于卵巢良性肿瘤患者和健康对照者(P均 < 0.05)。 结论 卵巢癌细胞促进外周血CD4+ T细胞糖酵解代谢水平增高,CD4+ T细胞糖酵解代谢的改变可能与其分化和功能相关。

    • LncSox4在非小细胞肺癌中的表达及生物学作用

      2019(10):731-736.

      摘要 (657) HTML (0) PDF 2.36 M (438) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:目的:检测LncSox4在人非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达水平变化,初步探讨其生物学作用及机制,为NSCLC诊断和治疗提供新的生物指标。 方法:采用qRT-PCR检测LncSox4在NSCLC患者肿瘤组织中的表达水平。通过克隆形成试验、生长曲线分析、Transwell迁移和侵袭试验检测敲除LncSox4对A549细胞生物学功能的影响;采用流式细胞术分析细胞周期情况;采用qRT-PCR和western blot检测上皮-间质转化(EMT)相关基因及蛋白质的表达水平。 结果:与癌旁对照相比,LncSox4在NSCLC癌组织中呈显著高表达(t=7.109,P<0.01);LncSox4基因沉默后,A549细胞生长速度减缓,细胞克隆形成数量减少(P<0.01),细胞迁移和侵袭能力降低(P<0.01),诱导细胞发生G1期阻滞(P<0.01);LncSox4基因沉默抑制A549细胞中Cyclin D1、c-Myc、N-cadherin、Vimentin蛋白的表达,促进E-cadherin蛋白的表达;LncSox4基因沉默还显著降低EMT相关转录因子Snail、Slug和Twist的表达水平。 结论:LncSox4在NSCLC中高表达,通过影响细胞增殖、迁移和侵袭促进NSCLC恶性进展,有望成为NSCLC诊疗新靶点。

    • 血清标志物M30和M65在原发性胆汁性胆管炎中的临床诊断价值分析

      2019(10):737-741.

      摘要 (1103) HTML (0) PDF 1.03 M (506) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 定量分析原发性胆汁性胆管炎(primary biliary cholangitis, PBC)患者血清中凋亡相关分子M30和M65的浓度水平及其对PBC的诊断价值。方法 研究对象为2017年1月到2019年4月间常熟地区PBC患者79例,健康体检者40例。血清收集后-80℃冰箱冻存待测。酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清M30和M65,全自动生化分析仪检测患者肝功能各项指标,免疫印迹法测定自身抗体。结果 PBC组M65较对照组显著升高(P<0.001),M30/M65比值较对照组显著降低(P<0.001),M30在两组间差异无统计学意义(P=0.641);PBC患者anti-GP210阳性组M30和M65较阴性组显著升高(P值分别为0.002和0.001),anti-SP100阳性组M65较对阴性组显著升高(P=0.027),M30/M65比值较阴性组显著降低(P=0.005);spearman相关性分析发现M30和M65与ALT、AST和TBI呈正相关关系(P<0.05);ROC曲线分析发现M30、M65、M30/M65比值的截断值(cut-off值)分别为63.62U/L、155.37U/L、0.32,敏感度分别为63.30%、89.10%、93.30%,特异性分别为51.60%、90.00%、75.00%。结论M65在PBC患者血清中显著升高,M30/M65比值显著降低,并与疾病的进展和预后可能存在相关性,可作为PBC实验室诊断良好的血清标志物。

    • >临床检验技术研究
    • 基于荧光素酶报告基因的细菌外膜囊泡标记方法的建立

      2019(10):742-744.

      摘要 (1078) HTML (0) PDF 1.46 M (598) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 建立一种基于荧光素酶报告基因的细菌外膜囊泡标记方法。方法 利用细菌外膜囊泡表面携带高丰度外膜蛋白的特点,构建外膜蛋白-荧光素酶融合蛋白,实现细菌外膜囊泡的“自发光”以用于后期检测。结果 通过构建OmpA-NanoLuc融合蛋白的方式实现细菌外膜囊泡的荧光素酶标记,表达该融合蛋白的细菌所分泌的外膜囊泡具有明确的荧光素酶活性,因此可通过检测荧光素酶活性的方式对细菌外膜囊泡进行检测。结论 成功构建了一种基于荧光素酶报告基因的细菌外膜囊泡标记方法,可在不使用细胞膜染料的情况下对细菌外膜囊泡进行检测。

    • >综述
    • 二代测序临床应用的质量控制

      2019(10):745-748.

      摘要 (744) HTML (0) PDF 940.39 K (1144) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:二代测序(NGS)技术在生命科学及临床医学领域方面的研究和应用越来越广泛。检测标准化和质量控制是二代测序技术体现临床应用价值的前提,对二代测序技术未来的发展具有重要意义。该文从二代测序国内外质量控制现状及特点、质量控制要求和方法及室间质评等方面进行阐述。

    • 肠球菌对利奈唑胺耐药的分子机制研究进展

      2019(10):749-751.

      摘要 (495) HTML (0) PDF 866.39 K (448) 评论 (0) 收藏

      摘要:肠球菌属细菌为院内感染的重要病原菌,不仅可引起尿路感染、皮肤软组织感染,还可引起危及生命的腹腔感染、败血症及心内膜炎。万古霉素耐药肠球菌(VRE)的出现为临床治疗带来了挑战,利奈唑胺作为VRE治疗的最后一道防线,其耐药分布及分子机制应该引起医务工作者的重视,本文从国内外耐药现状和耐药机制两方面进行阐述,尤其是23S rRNA的V区突变,L3、L4核糖体蛋白氨基酸突变,多重耐药基因cfr介导的耐药以及近来研究逐渐增多的optrA基因介导的耐药机制,为减缓耐药形成、耐药相关基因及时检出、早期干预提供一定的理论基础。

    • 三阴性乳腺癌相关LncRNAs研究进展

      2019(10):752-755.

      摘要 (484) HTML (0) PDF 912.24 K (523) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:三阴性乳腺癌(TNBC)因其恶性程度高、预后差且暂无有效的早期诊断和病程监测标志物而被广泛关注。长链非编码RNA(LncRNA)是一类长度超过200个核苷酸序列的非编码RNA,其作为肿瘤标志物是近年来的研究热点。多项研究显示,LncRNAs通过多种机制参与TNBC的发生、发展,可作为TNBC的恶性进展、肿瘤临床分期、诊断和疗效的标志物。该文就TNBC相关的LncRNAs研究进展作一综述。

    • 粪便钙卫蛋白检测及其实验影响因素

      2019(10):756-759.

      摘要 (1945) HTML (0) PDF 921.38 K (681) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:粪便钙卫蛋白(fecal calprotectin, FC)测定作为一项快速、简便、非侵入性的方法,在特定消化道疾患的诊断、病情监测、疗效评估等方面有着重要的价值与临床地位。但此项目缺乏统一的参考检测方法和对应的操作规程,分析前、中、后过程中的诸多影响因素会直接影响检测的准确性,故有必要对FC检测的实验影响因素作一总结,以期减少实验误差,从而保证结果稳定和可靠。

    • >专家论坛
    • MALDI-TOF MS在细菌耐药性检测中的应用进展

      2019(10):760-763.

      摘要 (601) HTML (0) PDF 920.13 K (838) 评论 (0) 收藏

      摘要:基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)已经发展成为微生物实验室鉴定菌种的常规工具。MALDI-TOF MS在微生物学耐药性检测中的应用尚处于研究阶段。本文就MALDI-TOF MS在细菌耐药性检测中的方法及其适用病原体的研究现状做一综述。

    • >综述
    • 耳念珠菌感染现状与研究进展

      2019(10):764-767.

      摘要 (940) HTML (0) PDF 904.48 K (517) 评论 (0) 收藏

      摘要:耳道念珠菌作为一类重要的感染性病原微生物,自2009年首次报道以来,世界多地不断有新的耳念珠菌检出,呈现出全球流行趋势,严重威胁人类生命健康,已引起各国重视。在本文着重探讨了当前耳念珠菌感染的现状与研究进展,作为一类很重要的医院获得新感染的病原微生物,容易造成院内的爆发和感染事件的发生,希望能够引起有关学者和相关部门重视,及时制定感染预防策略和治疗方案,加强耳念珠菌感染的诊断、治疗和预防的措施。

    • 慢性HBV感染者HBsAg低水平表达形成机制的研究进展

      2019(10):768-772.

      摘要 (925) HTML (0) PDF 814.69 K (457) 评论 (0) 收藏

      摘要:乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者中存在着一类乙肝表面抗原(hepatitis B surface antigen, HBsAg)持续低水平表达的人群。低水平HBsAg的产生并不意味着慢性HBV感染的良好转归,患者仍存在着病毒复制和肝脏的持续性损伤,具有潜在的传染风险,这给临床诊断和输血安全带来挑战,已受到国内外专家学者的高度关注和重视。该文旨在对慢性HBV感染HBsAg低水平表达形成机制的最新研究进展进行综述。

    • >专题笔谈
    • 如何更好地保证自身抗体的临床应用质量

      2019(10):773-775.

      摘要 (451) HTML (0) PDF 866.18 K (441) 评论 (0) 收藏

      摘要:自身抗体对自身免疫病(AIDs)具有重要的临床价值,是临床医生诊治AIDs的重要手段,但自身抗体及其检测技术很多固有的局限性使得自身抗体的质量控制相对比较薄弱。面对临床的迫切需要和自身抗体本身的缺点,检验人员该如何破解矛盾,最大程度地保证自身抗体的临床应用质量?本文围绕这一问题,进行了比较系统、深入的阐述,旨在为从事自身抗体检测的检验人员提供一些借鉴。

    • 医学细菌的分类和菌种鉴定思考

      2019(10):776-779.

      摘要 (796) HTML (0) PDF 894.47 K (487) 评论 (0) 收藏

      摘要:摘要:近年来,细菌的分类发生了很大的变化。一方面,新菌种不断涌现;另一方面,大量原有细菌被重新分类和发生了名称的改变。而与细菌分类变化相对应的是,在临床标本分离到不常见菌和新病原菌的报道越来越多,但由于受疾病研究和累计的病例数据影响,仅少数菌种有标准化的药敏试验方案和规范化的感染治疗用药指南。该文回顾细菌分类学历史和菌种鉴定方法,结合本实验室弗朗西斯菌的分类和菌种鉴定经验,探讨医学细菌的分类和菌种鉴定方法,从而为细菌性感染疾病的感染治疗提供依据。

    • >综述
    • 关于蛋白电泳中单克隆蛋白定量及报告标准化的建议解读

      2019(10):780-783.

      摘要 (725) HTML (0) PDF 874.88 K (360) 评论 (0) 收藏

      摘要:国际临床化学与检验医学联合会(International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine,IFCC)、美国病理家学会(the College of American Pathologists,CAP)和澳大利亚皇家病理学院质量保证计划(the Royal College of Pathologists of Australasia Quality Assurance Programs,RCPAQAP)的调查结果显示,实验室关于蛋白电泳中单克隆蛋白定量和报告标准化势在必行。本文介绍了加拿大单克隆丙种球蛋白病工作组(Monoclonal Gammopathy Working Group,MGWG)和澳大利亚-新西兰蛋白电泳报告标准化工作组关于单克隆蛋白术语、电泳检测技术、单克隆蛋白分离及定量中存在的若干问题、蛋白电泳中存在的干扰以及报告标准化的建议,呼吁国内同行重视蛋白电泳报告的标准化问题,提高蛋白电泳报告质量,降低临床差错风险。

    • >研究生园地
    • 鲍曼不动杆菌耐药性耐药监测与毒力基因检测及序列相关性分析

      2019(10):784-788.

      摘要 (828) HTML (0) PDF 2.63 M (442) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 了解鲍曼不动杆菌,分析鲍曼不动杆菌毒力基因存在状况。方法 收集75株鲍曼不动杆菌,Microflex质谱仪鉴定,phoneix-100系统检测药敏试验,聚类分析了解鲍曼不动杆菌同源性。PCR检测细菌外膜蛋白(ompA)、生物膜形成(adeH、csuA、pgaA)、铁摄取系统(basJ)、磷脂酶D(plcD)、荚膜阳性表型(ptk)和群体感应系统调节(abaI)8种毒力基因,并测序验证。分析鲍曼不动杆菌毒力基因与其耐药性关系。 结果 毒力基因ompA、adeH、csuA、pgaA、abaI、basJ、ptk和plcD的检出率分别为94%、100%、94%、99%、93%、96%、82%和99%。67株鲍曼不动杆菌中,同时检出3种基因的1株(1.5%)、5种基因的2株(3.0%)、6种基因的2株(3.0%)、7种基因14株(20.9%)和8种基因的48株(71.6%)。7种毒力基因阳性14株,对除多粘菌素、四环素以外的抗生素耐药率>78%。聚类分析结果显示,67株鲍曼不动杆菌共分为A、B两个基因型,A基因型2株,B基因型65株;B基因型分为B1、B2两个亚型,B1基因型2株,B2亚型分为B2a、B2b两个进化型,B2a共有33株;B2b共有30株。结论 聚类分析的结果提示我院鲍曼不动杆菌存在交叉感染的可能。鲍曼不动杆菌毒力基因阳性模式中,菌株耐药率随着毒力基因数量的增加而增加。为治疗多重耐药鲍曼不动杆菌感染寻找新的途径或作用靶点提供了更多的实验数据。

    • >临床检验方法性能评价
    • 不同实验室方法在肺结核辅助诊断中的应用评价*

      2019(10):789-792.

      摘要 (863) HTML (0) PDF 925.76 K (410) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 评价不同实验室方法在肺结核(PTB)诊断中的应用效能,为PTB的早期诊断提供数据参考。方法 2016年1月至2018年12月在上海市同仁医院肺科门诊诊治的298例疑似PTB患者,依照临床诊断,分为活动性肺结核组138例、非活动性肺结核组43例、非肺结核组117例。对其痰标本分别采用痰涂片快速抗酸染色、MGIT培养、Xpert MTB/RIF分子检测,采用卡方检验比较其敏感度、特异性。结果 痰涂片、MGIT培养、Xpert MTB/RIF和三种方法联合检测诊断活动性肺结核的敏感度分别为45.7%(63/138),63.8%(88/138),65.4%(87/133),78.2%(104/133),MGIT培养和Xpert MTB/RIF敏感度高于痰涂片(χ2值分别为35.79和11.26,P均<0.01),MGIT培养和Xpert MTB/RIF的敏感度无明显差异(χ2= 29.87,P>0.05),联合检测敏感度高于三种方法单独检测(χ2值分别为30.84,64.62,70.14,P均<0.01)。诊断特异性分别为99.1%(116/117),98.3%(115/116),99.1%(113/114),97.3%(110/113),三种方法的特异性无明显差异。三种方法在区分活动性肺结核与非活动性肺结核或非肺结核上具有一定的意义。(χ2值分别为92.63,138.95,137.16,P均<0.01),非活动性肺结核组与非肺结核组的阳性率之间均无显著差异。结论 MGIT培养与Xpert MTB/RIF对PTB检测具有较高的敏感度,三种方法联合检测可提高敏感度。

    • >质量管理研究
    • 应用EP09-C对两种荧光定量PCR仪测定HBV DNA的可比性分析

      2019(10):793-795.

      摘要 (877) HTML (0) PDF 1.23 M (534) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 对罗氏cobas? z480和ABI 7500 2种荧光定量PCR分析仪测定乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)的结果进行比对和偏移评估。方法 根据美国临床和实验室标准化协会(CLSI) EP09-C方案,采用罗氏cobas? z480(参比系统 X)和ABI 7500(待评系统 Y)2种荧光定量PCR分析仪分别单次测定40份患者血清样本HBV DNA浓度,极端学生化偏差(extreme studentized deviate, ESD)法对结果进行离群值检验,绘制散点图和偏差图,拟合回归方程,计算各参数的95%置信区间(confidence interval, CI)和医学决定水平处的偏移,以≤±0.4(LOG值)为可接受标准。结果 通过ESD法检验发现2个离群值,剔除离群值并补充2份相近浓度样本数据后再分析未发现离群值。根据偏差图特征分析差值具有恒定SD变化,绘制差值频数柱状图并经单样本K-S检验差值服从正态分布,采用均值初步估算偏移为0.086,小于可接受标准。进一步经OLR、WLS、Deming、Passing-Baklok(P-B)模型进行回归分析,并将医学决定水平分别代入回归方程中计算的偏移均小于可接受标准。结论 罗氏cobas? z480和ABI 7500 2种荧光定量PCR分析仪测定HBV DNA的结果具有可比性。

    • >案例分析
    • 肺吸虫病误诊为肺结核病1例分析

      2019(10):796-797.

      摘要 (625) HTML (0) PDF 2.26 M (488) 评论 (0) 收藏

      摘要:患儿,女,5岁半,哈尼族,云南省红河州金平县人。因“咳嗽,咯血”3年半到当地医院复诊,CT提示“肺空洞形成”。于2018年5月30日遂于昆明市儿童医院就诊,以“肺部病变原因待查(寄生虫病?肺结核?)”收入院。问诊得知,患儿于3年半前有半生吃溪蟹史及饮生水史,随后3个月出现咳嗽、咯血,当地医院诊断为“肺结核病”。经规律的抗结核药物治疗2年,症状无好转,后自行停药后服草药治疗数月,仍反复咳嗽。既往史:2岁时诊断“肺结核病”,院外服药2年,现已停药;无特殊,否认药物及食物过敏史,计划免疫同社会。出生、生长于原籍。体格检查:一般情况及精神欠佳,神清,慢性病容,双肺呼吸音粗,双肺未闻及明显啰音。心、腹、肝脾未见明显异常。生理反射存在,病理反射未引出。

    • >病例报告
    • 鼻疽分枝杆菌致肺部感染一例

      2019(10):798-800.

      摘要 (796) HTML (0) PDF 2.06 M (423) 评论 (0) 收藏

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