摘要:摘要：循环肿瘤细胞（circulating tumor cells，CTCs）的临床应用价值已经得到广泛认可，尤其作为“液体活检”的主要资源用于肿瘤精准医疗备受关注。然而，CTCs在患者血液中的含量极为稀少，灵敏度一直是CTCs检测及应用的主要瓶颈。目前，CTCs分离、富集、体外原代培养技术，获得细胞的生物学特性研究及其临床应用价值都还在不断探索和发展中，对它们的深层次和全方位的分析将有助于指导并推动CTCs的临床应用。

摘要:摘要：循环游离DNA（circulating cell-free DNA，cfDNA）是指存在于人体血液循环中的、游离于细胞外的高度片段化DNA。在特定情况下（如肿瘤患者、孕妇、接受器官移植的患者等），一小部分来自“异源性”细胞的cfDNA（如肿瘤细胞、胎儿细胞、或供体细胞）可以作为基因检测的标志物。基于cfDNA检测的“液态活检”技术在产前诊断、肿瘤的筛查、早期诊断、治疗监测和预后评估等多个方面受到极大的关注。该文就cfDNA的产生与特征、检测方法、检测指标、临床应用等作一总结及论述。

摘要:摘要：外泌体（exosome）作为目前液体活检领域中研究的热点已被证实可参与多种生物学的过程。其所包含的大量核酸如DNA、RNA以及大分子如脂类和蛋白质等，均可以外泌体为载体通过控制微血管生成、调节基质细胞、重铸细胞外基质以及建立“预转移微环境”等多种途径，从而促进肿瘤的侵袭与转移。该文以肿瘤细胞来源的外泌体为主要对象，介绍外泌体及其分离技术，并对其在结直肠癌中的研究进展进行分析及论述。

摘要:摘要:目的：检测胃癌患者血清中LINC00978〖表达水平，评估其表达水平与临床病理参数的关系，并探讨其临床诊断价值。 方法：实时荧光定量RT-PCR检测LINC00978在胃癌细胞、体检健康者、胃良性疾病及胃癌患者血清中的表达水平，分析其与胃癌患者临床病理参数的相关性，并用ROC曲线分析其诊断效能。 结果：LINC00978在人胃癌细胞系MGC-803中的表达水平（18.88±1.15）明显高于胃黏膜上皮细胞（1.00±0.03），差异有统计学意义（t=-21.926，P＜0.05）。LINC00978在胃癌患者血清中的平均含量［3.525(1.385，8.954)］较胃良性疾病患者［0.419(0.258，1.369)］和体检健康者［0.814(0.351，2.510)］均明显升高（Z值分别为-4.834和-4.686；P均＜0.01），且与淋巴结转移、浸润深度和TNM分期相关（r分别为0.448、0.369和0.383，P均＜0.01）；胃癌患者术后血清中LINC00978的表达水平［0.17(0.15,0.39)］较术前［0.98(0.59,1.61)］明显降低（Z＝-5.731，P＜0.01）。与体检健康者相比，LINC00978在胃良性疾病患者血清中表达差异无统计学意义（Z=-1.693，P＞0.05）。胃癌患者血清LINC00978的ROC曲线下面积（AUC^ROC）为0.807，95%可信区间（CI）为0.723~0.882，当cutoff值为1.806时，其诊断胃癌的敏感性为71.4%，特异性为75.9%。 结论：LINC00978在胃癌患者血清中呈高表达，且与淋巴结转移、浸润深度和TNM分期相关，有望成为潜在的胃癌诊断的生物学标志物。

摘要:摘要：目的: 检测急性胰腺炎（AP）患者血清miR-216a的表达水平，探讨其作为AP诊断及预后监测指标的临床应用价值。 方法：实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测80例轻症急性胰腺炎（MAP）、80例重症急性胰腺炎（SAP）患者及74例健康人对照血清miR-216a的表达水平。全自动生化免疫分析仪检测各组淀粉酶（AMY）、脂肪酶（LPS）、Ca²⁺、葡萄糖（Glu）、红细胞比容（HCT）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）和C反应蛋白（CRP）等指标。 ROC曲线及相关性分析评估miR216a对AP患者的临床应用价值。 结果：与健康人对照组［（11.12×10^-5（5.83×10^-5，19.12×10^-5）］相比，AP患者血清miR-216a的水平 ［38.49×10^-5（24.05×10^-5，62.02×10^-5）］明显升高（U=-9.10，P<0.01）。但MAP与SAP患者血清miR-216a水平［分别为36.46×10^-5（22.29×10^-5，55.80×10^-5）,40.44×10^-5（25.84×10^-5，65.48×10^-5）］差异无统计学意义（U=-0.96,P＞0.05）。miR--216a用于鉴别对照组和AP患者的ROC曲线下面积（AUC^ROC）为0.870（95%CI:0.825~0.915），cutoff值为0.61；用于鉴别对照组和MAP患者的AUC^ROC为0.865（95%CI:0.808~0.921），cutoff值为0.59；用于鉴别对照组与SAP患者的AUC^ROC为0.876 (95%CI:0.822~0.930)，cutoff值为0.66。AP患者治疗好转后，其血清miR-216a的表达水平由［41.88×10^-5（24.24×10^-5，64.44×10^-5）］下降至［20.58×10^-5（11.01×10^-5，41.91×10^-5）］，差异有统计学意义（U=5.24，P<0.01）。相关性分析结果显示，AP患者血清miR-216a的表达水平与CRP呈正相关（r=0.215 P=0.006）。 结论: AP患者血清miR216a水平明显升高，可用于AP辅助诊断及预后监测。

摘要:摘要：目的：从多发性肌炎/皮肌炎（polymyositis/dermatomyositis，PM/DM）患者外周血血清中分离鉴定外泌体（exosome），并进行初步的蛋白质研究。 方法：用ExoQuick^TM试剂盒分离纯化PM/DM患者血清exosome；透射电镜观察其形态特征，Nanosight可视型纳米颗粒分析仪检测粒径大小分布情况；western blot鉴定exosome的表面标志物CD9，CD81，Flotillin-2；BCA法对其所携带的蛋白质进行定量分析；十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）初步分析其蛋白质组分。 结果：〓透射电镜下患者血清exosome呈圆形或椭圆形膜性小囊泡，直径分布范围92±67 nm；western blot结果表明，PM/DM血清来源的exosome存在表面标志物CD9、CD81、Flotillin-2；BCA法测定PM/DM患者exosome总蛋白浓度为14.68（6.00，32.55）μg/μL，健康组exosome总蛋白浓度为14.09（8.00，23.28）μg/μL,SDSPAGE显示两组血清exosome均在Mr(×10³)为55~70处有高丰度蛋白质富集，在Mr(×10³)为40~55处存在差异条带。 结论：成功从PM/DM患者的外周血中分离出血清exosome,并为寻找差异蛋白质提供实验依据。

摘要:摘要：目的：分析非小细胞肺癌（NSCLC）患者血浆游离循环RNA（cfRNA）中的ALK融合基因的表达水平，为指导临床个体化用药提供依据。 方法：选取经高通量测序验证的已知ALK融合基因的NSCLC患者13例、ALK融合基因阴性的NSCLC患者16例和30例体检健康者，采集各组血液样本并分离血浆cfRNA，用荧光定量PCR检测各组ALK基因3′端第20外显子（E20）和5′端3外显子（E3）的表达量，并计算ALK融合基因的表达水平。 结果：已知ALK融合基因的NSCLC患者、ALK融合基因阴性的NSCLC患者和体检健康者血浆cfRNA中ALK融合基因表达水平分别为278.3（45.3，987.4），4.08（0.38，9.04），3.77（0.34，8.37），各组间差异有统计学意义（H=29.93, P<0.01）；组间两两比较结果表明，已知ALK融合基因的NSCLC患者血浆中ALK融合基因的表达水平高于ALK融合基因阴性的NSCLC患者或体检健康者（U分别为0，0，P均<0.01），而后两组间差异无统计学意义（U=232,P=0.86）。 结论：基于3′/5′端表达不平衡策略的荧光定量PCR法可以快速检测NSCLC患者血浆cfRNA中ALK融合基因。

摘要:摘要：目的：分析宫颈癌患者血清miR-130a的表达水平及临床意义。 方法：用荧光定量PCR检测60例宫颈癌患者和60例体检健康者血清miR-130a的表达水平，分析血清miR-130a水平与宫颈癌患者临床病理参数的相关性。 结果：与体检健康者（0.029±0.024）相比，宫颈癌患者血清miR-130a表达水平（0.087±0.038）明显升高（P<0.01）。miR-130a的高水平与肿瘤分化（P<0.01）以及肿瘤分期（P=0.01）密切相关。ROC曲线分析结果显示，血清miR-130a诊断宫颈癌的曲线下面积（AUC^ROC）为0.878（95%CI:0.809~0.947），敏感性为86.7%，特异性为90.8%。与早期宫颈癌患者（0.074±0.034）相比，晚期宫颈癌患者血清miR-130a表达水平（0.105±0.038）明显升高（P<0.05）；与术前（0.082±0.014）相比，宫颈癌术后血清miR=-30a表达水平（0.033±0.022）明显降低（P<0.01）。 结论：血清miR-130a有助于宫颈癌诊断和预后监测，并可作为宫颈癌进展的辅助判断指标。

摘要:摘要:目的：建立纳米金探针液相杂交法检测核酸序列依赖扩增（nucleic acid sequencebased amplification，NASBA）产物，用于快速诊断侵袭性曲霉病(IA)。 方法：采用NASBA扩增曲霉菌属特异性18S rRNA保守序列，扩增产物与5′端经巯基化俢饰的特异性纳米金探针进行液相杂交，用该法检测106例临床血液标本（14例确诊，32例拟诊，60例未感染IA）,并与GM试验结果进行比较以评价该方法的准确性。 结果：纳米金探针只与曲霉菌属菌株的NASBA产物出现阳性杂交反应，而其他非曲霉菌均为阴性。NASBA-纳米金液相杂交法检测106例临床标本的敏感性和特异性分别为82.61%（38/46）、81.67%（49/60）,ROC曲线下面积(AUC^ROC)为0.890。GM试验检测的敏感性和特异性分别为56.52%（26/46）和83.33%（50/60），AUC^ROC为0.723。 结论：NASBA-纳米金液相杂交技术检测曲霉菌感染具有敏感性高、特异性强、操作简单的特点，适合实验室常规开展。

摘要:摘要：目的：分析肾病综合征患儿肾活检组织miRNA的表达水平，并探讨其作为区分肾病病理亚型潜在标志物的可能性。 方法：收集肾病综合征患儿肾组织活检标本41例，包括系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)22例、微小病变(MCD)8例和毛细血管内增生性肾小球肾炎(ECPGN)11例，以8例无肾功能不全的成人肾组织为对照组。RT-qPCR检测各组肾组织中miR-191、miR-151-3p、miR-150、miR-19b和miR-30a-5p的表达水平，并分析其与肾功能相关临床指标的相关性。 结果：与正常肾组织相比，肾病综合征患儿肾组织中miR-191明显上调（P<0.01），miR-151-3p明显下调（P<0.01）。此外，MCD组miR-150表达水平明显低于对照组、MsPGN组和ECPGN组（P均<0.05）。 miRNA在肾组织中的表达与临床血清学指标IgG、TP和Cr均呈正相关，与TC呈负相关（P均<0.05）。 结论：miRNA在肾病综合征患儿肾组织中的表达与病理分型有关，miR-150具有潜在区分肾病患儿MCD型与其他亚型的鉴别诊断价值。

摘要:摘要：目的：对4例经由新生儿筛查发现的不同临床类型的3甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症（3-methylcrotonyl-coenzyme A carboxylase deficiency，MCCD）患儿，用尿气相色谱质谱和基因分析证实其诊断。 方法：对新生儿筛查中C4DC+C5OH＞0.6 μmol/L的新生儿召回复查，同时检测其母亲的C4DC+C5OH浓度。用尿气相色谱质谱分析对MCCD疑诊病例进行临床诊断，再通过基因分析进一步证实。 结果：通过基因诊断确诊MCCD 3例，包括MCCD患儿1例，父源性MCCD 1例，母源性MCCD 1例。另有1例临床诊断的MCCD患儿经基因检测仅找到1个致病位点。 结论：对新生儿筛查中发现的C4DC+C5OH增高的新生儿家系（包括母亲和父亲）应行MS/MS检测。疑似MCCD患者基因检测仅发现1个致病位点时不要轻易否定MCCD的诊断，建议定期随访。

摘要:摘要：目的：分析深圳地区小儿地中海贫血的基因类型及突变频率，为该疾病基因诊断及遗传咨询提供参考。 方法：回顾性分析1 206例疑似地中海贫血患儿，采用跨越断裂点PCR(GapPCR)检测缺失型α地中海贫血，反向点杂交（RDB）技术检测α和β地中海贫血基因点突变，巢式PCR检测疑似HKαα的样本并用基因测序验证疑似罕见地中海贫血的样本。 结果：1 206例病例中共检出927例地中海贫血(76.9%)，其中489例(40.5%)α地中海贫血，主要以--SEA/αα为主（与75.1%）；406例(33.7%)β地中海贫血，主要以IVS-2-654杂合子和CD41-42杂合子为主（分别占35%和32.5%）。检出αβ复合型地中海贫血32例(2.7%)。此外，发现HKαα/ααQS、α地中海贫血突变基因类型CD61(AAG→TAG)/--SEA、β地中海贫血基因突变类型CD5(CCT→C)各1例。 结论：深圳地区地中海贫血患儿基因突变类型复杂多样，且存在多例罕见病例。

摘要:摘要：目的：探讨IL-27在急性冠脉综合征（ACS）中的临床应用价值。 方法：入选208例ACS患者，其中ST段抬高的心肌梗死（STEMI）76例、非ST段抬高的心肌梗死（NSTEMI）58例和不稳定心绞痛（UAP）74例；根据冠脉病变数分为单支、双支和三支病变组；以同期62例胸痛综合征（CPS）患者作为对照组。用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组血浆IL27的表达水平并进行统计学分析。 结果：与对照组100.66（68.98,228.86）pg/mL比较，STEMI组、NSTEMI组、UAP组血浆IL27表达水平［分别为308.64（245.17,359.26）、256.88（181.52,332.51）、218.12（165.33,312.46）pg/mL］均明显升高（P均<0.01）；组间两两比较结果表明，STEMI组血浆IL-27浓度明显高于NSTEMI组和UAP组（P均<0.05）；，在TnI阴性的ACS患者中，IL-27阳性率为54.24%（32/59）；IL-27在胸痛患者中预测ACS发生的敏感性和特异性分别为80.29%和58.06%。冠脉三支病变组IL-27表达水平明显高于单支病变组（P<0.05）。 结论：IL-27在ACS患者外周血中表达明显升高，可能参与了ACS的发病机制。IL-27对TnI阴性的ACS患者以及ACS病情判断具有一定临床价值。

摘要:摘要：目的：分析类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis, RA）患者外周血CD4/CD8双阳性T细胞（double positive T cells, DPT）的表达水平及功能，并探讨DPT在RA发病中的作用。 方法：通过流式细胞术检测25例RA患者及25例健康人对照外周血CD3+细胞中CD4+/CD8+双阳性细胞的比例；ELISA法检测RA患者及健康人对照血清中抗环瓜氨酸肽抗体（ACCP）、IL-6、TNF-α、IFN-γ和IL-12的表达水平，全自动生化分析仪检测C反应蛋白（CRP）、类风湿因子（RF）。 结果：与健康人对照组相比，RA患者组DPT占CD3+T细胞的比例明显升高，两组间差异具有统计学意义（t=4.63, P<0.01）；RA患者组的ESR、CRP、RF、ACCP、IL-6和TNF-α水平均高于健康人对照组，差异有统计学意义（t分别为3.71，2.99，8.42，4.25， 2.12，3.23；P分别为0.000 5，0.004 3，0.01，0.01，0.039，0.002 3）。DPT的表达水平与RA患者的年龄，ACCP，RF及血清中IFN-γ、TNF-α、IL-12的水平不相关，而与患者ESR，CRP，IL-6水平呈正相关（r分别为0.65，0.4，0.46；P分别为0.000 4，0.04，0.02）。 结论：RA患者外周血DPT表达水平明显升高，在RA发病及进展中发挥重要作用。

摘要:摘要：目的：分析血清胆碱酯酶（CHE）水平与急性冠脉综合征（ACS）的相关性，探讨其在ACS中的作用及临床意义。 方法：回顾性分析2014年10月至2016年10月浙江大学医学院附属邵逸夫医院心内科收治的ACS患者264例，将其分为急性ST段抬高性心肌梗死（STEMI）组（n=175）和非ST段抬高性急性冠脉综合征（NSTE-ACS）组（n=89），观察2组患者的基础临床资料（性别、年龄、吸烟史、有无合并高血压病及糖尿病），并对2组患者血清胆碱酯酶（CHE)、C反应蛋白（CRP）、白细胞计数(WBC)、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、血糖（Glu）、糖化血红蛋白（HbA1c）、肌酐（Cr）、尿素（Ure）进行相关性分析。 结果：STEMI组吸烟史、CHE、WBC、TC、L-LDL、Glu均高于NSTE-ACS组，差异均有统计学意义（P均<0.05）；相关性分析结果表明，CHE与ACS患者TC、TG、LDL-C、HbA1C、Glu、吸烟史呈正相关（r分别为0.29、0.27、0.18、0.19、0.15、0.19，P均<0.05），与年龄、Cr、Ure、CRP呈负相关（r分别为-0.39、-0.26、-0.27、-0.17，P均<0.05）。 结论：血清CHE水平在STEMI患者较NSTE-ACS患者升高，其水平在一定程度上可反映ACS的严重程度。

摘要:摘要：目的：分析Keleh样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keleh-like ECHassociated protein 1，Keap1)的表达水平与食管鳞状上皮细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)淋巴结转移和浸润深度的关系。 方法：采用免疫组化SP法检测ESCC患者的癌组织和癌旁组织中Keap1的表达水平，通过单因素和多因素分析及趋势χ²检验分析其与ESCC淋巴结转移和浸润深度的关系。 结果:Keap1高表达与淋巴结转移（OR=3.945，95%CI：1.485~9.147）和浸润深度（OR=4.683，95%CI：1.692~10.275）有关；Keap1高表达是ESCC淋巴结转移的危险因素（Wald χ²=23.579，P<0.01），趋势χ²检验结果显示，ESCC患者淋巴结转移的风险随Keap1表达水平的升高而升高（χ²=5.173，P=0.023）；Keap1的表达是ESCC侵及浆膜的危险因素（Wald χ²=26.587，P<0.01），趋势χ²检验结果显示，ESCC侵及浆膜的风险随Keap1表达水平的升高而升高（χ²=9.788，P=0.002）。 结论: Keap1的表达与ESCC的发生、发展有关，Keap1的表达可促进ESCC的淋巴结转移和浸润。

摘要:摘要：P53基因作为常见的抑癌基因，具有阻滞细胞周期、维持基因组稳定等功能。随着研究的深入，发现P53基因在肿瘤微环境及细胞代谢中亦有着重要的调节作用，其可通过调节细胞因子、免疫细胞、免疫卡控点以及葡萄糖代谢、脂质、能量代谢及细胞自噬等方式抑制肿瘤的发生、发展。但P53极易突变，突变型P53不仅失去了其抑癌功能，而且获得了致癌活性。对P53及突变型P53在肿瘤发生过程调控机制的深入研究，将为其在肿瘤治疗的应用提供更有力的科学依据。同时对P53基因检测技术的探索也是从传统检测技术到新型生物传感技术的逐渐认识过程。该文主要就P53基因在肿瘤微环境、细胞代谢调控机制及P53基因检测技术的研究进展作一综述。

摘要:摘要：结直肠癌（colorectal cancer, CRC)由于其高患病率和死亡率成为世界性的公共卫生问题。研究发现，微小RNA（microRNA，miRNA)在CRC发生、发展中起着重要的作用，与CRC的诊断、分期、进展和预后密切相关，为CRC的早期发现和治疗起到一定的指导作用。该文就miRNA的产生及功能、检测技术及其在CRC中的临床应用价值作一综述。

摘要:摘要：长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)是非编码RNA(non-coding RNA,ncRNA)的重要组成部分。研究发现，lncRNA在乳腺正常发育及肿瘤发生过程中具有重要作用，其表达水平的改变与乳腺癌发生、发展、转移和耐药密切相关，可作为乳腺癌诊断、疗效预测和预后评估的重要生物学标志物。近年来，随着高通量测序技术的发展以及生物信息学分析方法的丰富，与乳腺癌相关的lncRNA被大量发现和验证。为此，该文就lncRNA在乳腺癌中的最新研究进展作一综述。

摘要:摘要：目的：探讨c-Jun N端激酶(JNK)信号转导通路在肠道病毒71型（EV71）感染中的作用。 方法：台盼蓝染色法检测不同浓度抑制剂SP600125对人横纹肌肉瘤细胞（RD）活性的影响；实时荧光定量PCR及western blot检测EV71感染RD细胞后VP1 mRNA及蛋白质的表达水平；western blot检测JNK1/2、c-Fos、c-Jun蛋白及其磷酸化水平，并分析JNK1/2抑制剂SP600125对EV71复制及JNK1/2信号通路的影响。 结果：台盼蓝染色结果表明，与空白对照组比较，5和10 μmol/L实验组存活率差异无统计学意义（P均>0.05），而20 μmol/L抑制剂组细胞存活率明显降低（P＜0.05）；实时荧光定量PCR及western blot结果表明，与对照组相比，实验组在EV71感染RD细胞8 h后，其VP1 mRNA及蛋白质的表达水平均明显下降（P均<0.01）。此外，western blot检测结果证实EV71感染RD细胞后，其JNK1/2、c-Fos和c-Jun的蛋白质磷酸化水平均明显升高（P均<0.05）。而经抑制剂SP600125处理可明显下调其JNK1/2、c-Fos、c-Jun磷酸化水平（P均<0.05）。 结论：JNK1/2信号通路可被 EV71感染有效激活，并与EV71复制有关。

摘要:摘要：目的：筛选大鼠原代脑微血管内皮细胞氧糖剥夺/复氧（OGD/R）模型中合适的内参基因。 方法：实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测3种常用管家基因：3-磷酸甘油醛脱氢酶(APDH)、β-肌动蛋白(ACTB)、核糖体蛋白L13A(RPL13A)在大鼠原代脑微血管内皮细胞中的表达水平；并采用GeNorm程序分析得到最稳定的内参基因。 结果：RPL13A、GAPDH、ACTB基因表达稳定度的平均值（M值）分别为0.590、0.570、0.397。 结论：在大鼠原代脑微血管内皮细胞OGD/R模型中表达最不稳定的内参基因是RPL13A最稳定内参基因是ACTB。

摘要: