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摘要:摘要：目的：建立检测人感染新型甲型禽流感H7N9病毒的四重荧光定量RT-PCR方法。 方法：以人细胞RNA酶P（RNase P）基因为内参，用Primer Express3.0软件设计PCR特异性引物和探针。通过不同来源的呼吸道病毒进行特异性分析，构建质粒标准品用于分析该方法的灵敏度和重复性，并对1 896例临床标本进行回顾性检测。 结果：该方法检测甲型流感病毒（Flu A）、H7、N9与RNaseP灵敏度均达10² copies/mL，特异性达100%，每对引物和探针只检测出相应的病毒，无交叉反应，检测变异系数（CV）均低于1.55%。用该法检测1 896例临床标本，结果Flu A 235例，H7N9 127例，与其他试剂报告结果完全一致。 结论：建立的四重荧光定量RT-PCR法可快速检测H7N9病毒，灵敏度与特异性好，可用于H7N9病毒感染患者的早期诊断。

摘要:摘要：目的：用甲基化敏感性高分辨率熔解曲线法（MS-HRM）定量检测结直肠癌组织及外周血中MGMT基因甲基化水平，并结合结直肠癌病理参数分析探讨MGMT基因甲基化的临床意义。 方法：以33例结直肠癌组织和配对的正常黏膜组织以及其中16例患者的外周血为研究对象，用MS-HRM进行MGMT基因甲基化检测，分析MGMT基因甲基化与结直肠癌临床病理特征的关系和MS-HRM的方法特点。 结果：MS-HRM从33例结直肠癌患者的癌组织中检测到12例（36.4%）MGMT基因启动子不同程度的甲基化（甲基化＜5% 1例，5%~10% 3例，10%~25% 3例，25%~50% 2例，50%~75% 3例），对应的正常结直肠组织中仅检测到甲基化＜5% 1例（3.0%）。16例外周血中检测到甲基化小于＜5% 3例（18.8%）。MGMT基因甲基化与患者的年龄、性别、肿瘤部位无相关性（P＞0.05），但与结直肠癌的病理分期和分化程度的相关性有统计学意义（P＜0.05）。 结论：MS-HRM可定量检测结直肠癌MGMT甲基化水平。MGMT基因甲基化与结直肠癌的进展评估有关。

摘要:摘要：目的：对现有解脲脲原体(Uu)液体培养基进行改良，改善液体培养法较高的假阳性和（或）假阴性率，探寻一个简便、可靠的临床检测Uu的方法。 方法：向商品化Uu液体培养基中增添头孢匹罗并下调pH值至6.0后作为改良培养基。以固体培养法为金标准，用原液体培养基(包括未过滤组、过滤组)和改良培养基平行检测76例临床标本，通过敏感性、特异性、Kappa值及预测值等指标对不同液体培养基的培养效果进行评价。 结果：固体培养法的阳性检出率为76.3%（58/76）。以固体培养结果为金标准，传统液体培养法未过滤时的敏感性（98.3%）高，特异性（55.6%）低，假阳性率（44.4%）高；过滤后其假阳性率（11.8%）降低，假阴性率（25.9%）升高；而改良培养基的敏感性（94.8%）、特异性（83.3%）、阳性预测值（94.8%）及阴性预测（83.3%）均较高。 结论：改良后的液体培养基抑制杂菌效果较好，其检测结果与固体培养结果一致性较高，且改良步骤简单，具有一定的临床应用推广潜质。

摘要:摘要:目的：报道1例Wolf-Hirschhorn综合征携带1条环状4号染色体合并严重少精子症的病例，并探讨精子发生障碍的可能机制。 方法：为检测患者初级精母细胞染色体的联会、重组和转录失活情况，用荧光标记联会复合体蛋白3（synaptonemal complex protein 3, SCP3）、错配修复基因蛋白（mut L homolog 1, MLH1）和乳腺癌易感基因1(breast cancer susceptibility gene 1, BRCA1)蛋白对睾丸活检样本进行免疫荧光染色。 结果：SCP3染色显示对照组偶线期精母细胞占5.2%，而患者偶线期的精母细胞显著增高占35.4%，表明患者的生精阻滞在初级精母细胞的偶线期。MLH1染色显示每个细胞的结合位点数对照组为47.8±4.5，患者为45.9±5.9，后者明显减少(U=2.62,P＜0.05)。BRCA1染色显示患者所有粗线期细胞中都带有1条环状4号染色体，并有不同程度的不配对区域。 结论：环状4号染色体可能影响生殖细胞减数分裂Ⅰ期的进展，影响联会复合体的形成及未联会区域基因转录的活性，从而使精子的生成障碍，导致不育。

摘要:摘要：目的：评估抗念珠菌烯醇化酶（enolase, Eno）抗体（抗Eno）对侵袭性念珠菌病（invasive candidiasis, IC）的诊断价值，分析IC患者体内抗Eno水平变化趋势及影响因素。 方法：连续收集外科重症监护病房（ICU）IC易感患者从入住ICU当天到转出ICU或死亡的血清样本，3~5 d 1份（共收集血清1 200份，每例患者1~26份不等）。用ELISA法测定抗Eno抗体。结合念珠菌培养结果，观察抗体水平首次升高、下降的时间及影响因素。 结果：307例临床显示脓毒症患者中，68例抗Eno阳性，34例念珠菌培养阳性。抗体与念珠菌培养共同阳性者21例，其中半数以上患者的抗Eno水平升高出现在培养结果阳性前；高水平抗Eno在30~60 d下降至临界值以下。47例抗体阳性但培养阴性患者中，预防用抗真菌药22例（46.8%）;13例抗体阴性的确诊病例中，11例使用糖皮质激素。 结论：抗Eno诊断IC的敏感性高于念珠菌培养，特别是对于预防性用抗真菌药的患者；抗体水平首次升高出现在IC早期，随后下降，使用免疫抑制剂可干扰抗体检出。

摘要:摘要：目的：用分支DNA（bDNA）技术定量检测卵巢癌患者血清游离DNA（cf-DNA）含量，探讨其与临床病理参数的关系及对卵巢癌辅助诊断的价值。 方法：收集67例卵巢癌患者、22例卵巢良性肿瘤患者和29例健康妇女静脉血标本。用bDNA技术检测各组血清cf DNA浓度，化学发光法检测血清CA125和HE-4含量；用Krudkal-Wallis H检验比较各组间总体差异，Mann-Whitney U检验进行两两比较；绘制ROC曲线评价上述三项指标的诊断效能。 结果：卵巢癌组、卵巢良性肿瘤组和健康对照组血清cf-DNA含量分别为：865.41(497.62~1 311.56)、221.08（90.93~356.07）和199.94（78.73～396.21）μg/L，卵巢癌组显著高于良性肿瘤组和健康对照组（P均＜0.01）；按FIGO分期为Ⅲ期和Ⅳ期的卵巢癌患者显著高于Ⅰ~Ⅱ期组（P均＜0.01），Ⅲ期和Ⅳ期组间差异也有统计学意义（P＜0.05）。卵巢癌组血清cf-DNA的ROC曲线下面积、诊断敏感性和特异性分别为：0.886、83.9%、84.2%,均高于CA125（0.774、74.2%、63.2%）和HE-4（0.706、74.2%、78.9%），cf-DNA、CA125和HE-4联合检测的敏感性和特异性可提高到92.54%（62/67）、88.24%（45/54）。 结论：bDNA技术检测血清cf-DNA对卵巢癌诊断的敏感性和特异性高于CA125和HE-4，可作为卵巢癌辅助诊断的一个重要分子生物学指标。

摘要:摘要:目的：评价肝素酶纠正的血栓弹力图（hmTEG）在胸心外科患者术后的应用价值。 方法：选择268例胸心外科患者，在胸心外科手术后检测普通TEG和hmTEG，两组结果分别进行配对t检验。其中，31例患者同时检测了活化凝血时间（ACT），将ACT值与hmTEG各参数进行相关性分析。 结果：〓普通TEG和hmTEG各参数比较，最大振幅（MA）差异未见统计学意义（P>0.05），R、K、Angle和CI(凝血综合指数)差异均有统计学意义（P<0.05）。ACT与K、△R呈正相关，r分别为0.500、0.536，P<0.05；ACT与Angle、MA、CI呈负相关，r分别为-0.383、-0.323、-0.334，P<0.05；ACT与R不相关。 结论：hmTEG在监测胸心外科患者术后的凝血功能及判断肝素残留方面具有一定价值。

摘要:摘要：目的：了解胃癌发病过程中融合基因表达水平的变化，探讨其在胃癌的发病机制中的作用。 方法：用Illumina高通量测序仪对早期胃癌患者组织及匹配的癌旁组织进行RNA测序，以检测差异基因表达水平及结构变化。 结果：在胃癌组织中发现1 590个基因上调和709个基因下调；功能富集分析表明，这些差异表达基因富集于细胞周期、肿瘤侵入与扩散有关的基因实体（gene ontology，GO）注释中；且在约40%(2/5)的胃癌患者的癌组织中发现融合基因LRP5-LITAF。 结论：发现了胃癌发病过程中的大量差异表达基因及融合基因LRP5-LITAF，为胃癌的辅助诊断及靶向治疗提供了初步实验依据。

摘要:摘要：目的：探讨巨噬细胞炎性蛋白-1α(macrophage inflammatory protein 1α，MIP-1α)在口腔鳞状细胞癌（OSCC）患者血清中的表达及意义。 方法：收集29例健康人、21例经病理证实为白斑的患者和60例OSCC患者的血清，用ELISA检测MIP-1α的表达水平，分析其与临床、病理参数的关系。 结果：白斑患者和OSCC患者血清中MIP-1α的水平分别为170.6(145.0, 252.0) pg/mL和118.2(60.48, 230.0) pg/mL，较健康人82.54(52.26,105.8) pg/mL显著上升，差异有统计学意义（U=53.0, P<0.01；U=575.5，P=0.010 1）。TNM分期Ⅲ~Ⅳ期OSCC患者血清中MIP-1α水平高于Ⅰ~Ⅱ期（P<0.05），肿瘤直径＞4 cm的患者血清中MIP-1α水平高于肿瘤直径≤4 cm的患者（P<0.05）。MIP-1α的表达与外周血中单核细胞比例呈正相关（P<0.05），与外周血中性粒细胞比例呈负相关（P<0.05）。 结论：OSCC患者血清MIP-1α的表达升高，提示其可能在肿瘤发生、发展中发挥一定的作用。

摘要:摘要：目的：观察健康人和2型糖尿病（T2DM）患者口服葡萄糖耐量试验（OGTT）餐前、餐后铁代谢指标的变化，探讨血糖对铁代谢指标的影响。 方法：研究对象分为健康人对照组和T2DM组，均采集OGTT餐前、餐后2 h外周静脉血，用全自动分析仪检测葡萄糖（Glu）、铁（Fe）、转铁蛋白（Tf）、铁蛋白（Ferr）和总铁结合力（TIBC），并作统计学分析。 结果：健康人对照组和T2DM组餐后2 h血浆Fe与餐前比较均降低（P均<0.05）；健康人对照组餐后2 h较餐前血浆TIBC升高（P<0.05），Tf差异无统计学意义（P>0.05），T2DM组Tf、TIBC降低（P<0.05）；T2DM组Ferr高于健康人对照组（P<0.05）。 结论：T2DM患者贮存的铁过量；与餐前相比，餐后2 h血浆中循环铁减少，TIBC降低，组织内铁增加，铁负荷加重。

摘要:摘要：目的：用生物信息学分析方法对幽门螺杆菌（HP）cag致病岛中的CagⅠ蛋白进行综合分析，推断其结构和功能，并探索其在HP致病中的作用。 方法：用antherprotV5.0软件和网络数据库等分析预测其结构， BLAST程序搜索其同源序列；用PROSITE SCAN 和Fingerprint服务器分析推测其潜在的功能。 结果：CagⅠ蛋白有361个氨基酸〖JP2〗残基，分子量(Mr)为39 370，理论等电点为5.56；N′端20个氨基酸残基为信号肽，有三段跨膜区，二级结构和三级结构中螺旋结构为主体(约80%)；CagⅠ为稳定的疏水蛋白，保守性很强，有N 糖基化作用位点、蛋白激酶C磷酸化位点、酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点和豆蔻酰化作用位点；存在膜蛋白、菌毛蛋白、转运蛋白、ATP/GTP酶、转录调节因子、分泌系统蛋白等多个蛋白质标签。 结论：Cag Ⅰ蛋白定位于HP外膜，是Ⅳ型分泌系统重要组成蛋白质，在信号转导和物质转运过程中充当信使或载体，可能具有水解酶及ATP/GTP酶活性。

摘要:摘要:目的:监测评价2013年江苏地区12家医院细菌耐药情况。 方法:收集12家医院2013年全年临床分离菌的信息，用WHONET 5.6软件进行统计分析，细菌计数剔除同一患者重复分离的相同菌株，药物敏感性的判读选用软件自带的美国临床和实验室标准化协会(CLSI)2013年版标准。 结果:收集12家医院2013年1~12月临床分离细菌60 505株，其中革兰阳性菌20 251株（占33.5%），革兰阴性菌40 254株（占66.5%）。葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的检出率分别为54.5％和83.4％；肠球菌属中万古霉素耐药的屎肠球菌占5.4%、粪肠球菌占1%；革兰阴性杆菌中肠杆菌科细菌占59.4%，非发酵菌占39.0%。肠杆菌科细菌对第三代头孢菌素的耐药率在33.2%~56.8%之间，对碳青霉烯类抗菌药物耐药率在6.1%~8.4%之间。非发酵菌中铜绿假单胞菌占41.3%，鲍曼不动杆菌占37.7%。其中铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率为30.9%和27.4%，鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率为64.0%和66.4%。 结论: 与2012年比较，2013年江苏地区细菌耐药性仍很严重。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、多重耐药的鲍曼不动杆菌和多重耐药的铜绿假单胞菌的分离率略有降低；但耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌、万古霉素耐药的屎肠球菌和碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌的分离率均高于2012年。

摘要:摘要：载脂蛋白M（apo M）主要存在于高密度脂蛋白中，在脂质和脂蛋白代谢、抗动脉粥样硬化等过程中均发挥着重要作用。研究表明，apo M基因多态性与多种疾病，如冠心病、缺血性脑卒中、糖尿病、类风湿关节炎、慢性阻塞性肺炎、败血症等密切相关。本文就apo M基因启动子区域单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms，SNP）在疾病中的研究进展进行综述。

摘要:摘要：固有免疫反应构成了机体免疫系统的第一道防线，在抵抗病毒感染的过程中发挥着重要作用。在此过程中宿主细胞通过模式识别受体(pattern recognition receptor,PRR）识别侵入的病原微生物的病原体相关分子模型(pathogen associated molecular pattern,PAMP)，激活下游信号级联反应，诱导宿主细胞释放促炎症细胞因子及Ⅰ型干扰素，抑制病毒的复制及感染。其中，维甲酸诱导基因Ⅰ受体（RIG-Ⅰ like receptors,RLR）定位于胞浆，是识别胞浆中病毒RNA的主要受体，在抗病毒固有免疫反应起着非常重要的作用。本文就RLR信号通路在病毒感染中作用机制的研究进展作一综述。

摘要:摘要:目的：观察短暂性脑缺血发作（TIA）患者血清氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）水平及其与ABCD2评分间的关系。 方法：选取82例TIA患者和55例健康对照者；根据ABCD2评分，将TIA患者分为高危亚组（ABCD2>3，n=39）和低危亚组（ABCD2≤3，n=43）。分别检测两组TIA患者和健康对照者血清ox LDL水平，同时分析其血脂、清蛋白（Alb）及高半胱氨酸（Hcy）水平，并进行统计学分析。 结果：与健康人对照组比较，TIA患者血清ox-LDL及三酰甘油、游离脂肪酸、Hcy水平均升高（F分别为15.97、11.85、8.22、和18.56，P均<0.001），高密度脂蛋白胆固醇、Alb水平均降低（F分别为21.27、15.39，P均<0.001）。TIA患者中，高危亚组ox-LDL水平高于低危亚组（t值为2.39，P=0.02）。多因素Logistic回归分析显示，在校正了年龄、性别、其他血脂指标及Alb水平的影响后，高ox-LDL、Hcy水平是TIA的危险指标（高危亚组：ox-LDL，风险比（OR）=1.17，95%可信区间（CI =1.06~1.30；Hcy，OR=1.77，95%CI=1.04~2.96；低危亚组：ox-LDL，OR=1.10，95%CI=1.01~1.21；Hcy，OR=1.65，95%CI：1.01~2.70）；且ox-LDL对两组TIA患者的鉴别仍具有意义（OR=1.06，95%CI：1.00~1.13）。 结论：TIA患者血清ox-LDL水平升高，与ABCD2评分密切相关。

摘要:摘要:目的：建立检测生殖支原体(M.genitalium, Mg)的环介导等温扩增方法。 方法：根据GenBank公布的Mg核苷酸序列，设计4条特异性引物，进行PCR反应，对内、外引物浓度，dNTPs和MgSO₄浓度及Bst DNA 聚合酶用量等进行优化，建立Mg LAMP的检测方法并进行特异性和敏感性评价；对20份HIV感染者的DNA样本分别进行LAMP和常规PCR检测。 结果：内、外引物浓度分别为1.6和0.2 μmol/L，dNTPs浓度为1.6 mmol/L，MgSO₄浓度为12 mmol/L，Bst DNA 聚合酶用量为8 U时，LAMP反应效果较好；用该体系检测同源关系较近的穿通支原体(M.penetrans, Mpe)、梨支原体(M.pirum, Mpi)均呈阴性；对Mg的检测灵敏度可达10^-7;20份HIV感染者用LAMP法及常规PCR法各检出Mg阳性标本5份，两法的检测结果一致。 结论：建立的Mg LAMP检测方法的特异性、灵敏度较好，成本低廉，适合临床应用。

摘要:摘要：目的:研制3个水平冰冻混合人血清甲胎蛋白（AFP）候选标准物质。 方法:使用体检健康者肉眼无溶血、脂血和黄疸的混合血清作为稀释血清，将AFP高值血清稀释成3个浓度水平，通过微孔滤膜过滤除菌后分装于冻存管中。按照ISO Guide 35的要求，对人血清AFP候选标准物质进行均匀性和稳定性检验。用化学发光免疫分析仪将制备的AFP候选标准物质与WHO标准物质(72/225)同批检测，将结果进行比较，对候选标准物质定值。将3个水平候选标准物质发放到北京市34家实验室用不同常规分析系统测定。 结果: 均匀性检验方差分析结果显示，制备的候选标准物质均匀性良好。在室温18~25 ℃保存可稳定5 d；2~8 ℃可稳定10 d；-15~-20 ℃可稳定6个月；-80 ℃保存在已监测6个月内稳定性良好，长期稳定性计划监测2年。3个水平的AFP候选标准物质定值为（26.37±1.81）ng/mL、（123.52±7.54）ng/mL、（3 614.70±340.31）ng/mL。34家实验室测定结果显示，不同品牌检测系统测定结果均值与定值偏倚均＜12.5%(1/2 CLIA′88 TEa)。 结论：3个水平冰冻混合人血清AFP候选标准物质均匀性、稳定性良好。定值可靠，在常规分析系统中互通性良好。可用于临床实验室常规检测方法的校准/校准验证、试剂厂家常规校准品的定值、室间质量评价及正确度验证计划。对申报为人血清AFP国家二级标准物质提供了依据。

摘要:摘要：目的：通过荟萃（Meta）分析系统评价抑癌基因p16启动子区异常甲基化与肝细胞癌易感性的关系。 方法：利用Pubmed、Embase、Ovid、Web of science、Cochrane Library等数据库，中国生物医学文献数据库(CBM)、中文科技期刊全文数据库（VIP）、中国期刊全文数据库(CNKI)、万方数据库检索2014年6月以前的相关文献，按纳入排除标准筛选文献并提取数据，用RevMan5.2软件统计分析。 结果：共纳入研究23项累计病例2 245例，其中肝细胞癌组1 106例，对照组1 139例（包括癌旁组织402例、肝硬化239例、肝炎39例、正常组织141例，肝结节22例以及非癌组织296例）。p16基因甲基化阳性率在肝细胞癌组织中均显著高于正常肝组织［OR=21.18，95%CI（9.75~46.00），P<0.05］、非癌组织［OR=7.97，95%CI（4.64~13.68），P<0.05］及肝硬化组织［OR=6.18，95%CI（4.16~9.18），P<0.05］。结论：p16基因高甲基化与肝细胞癌易感性密切相关。

摘要:摘要：目的：了解体检人群中QFT-GIT检测不确定结果（ITRs）的发生率，探讨该结果产生原因。 方法：回顾性分析我院5 452例筛查结核病的体检者的QFT-GIT结果，比较分析ITRs发生率及空白对照（Nil）管、结核抗原（TB Ag）管和促有丝分裂因子（Mitogen）管的IFN-γ浓度。对ITRs标本进行复查，分析产生该结果的主要原因。 结果：5 452例体检者经QFT-GIT首次检测，共有215份（3.94%）为ITRs，其中女性ITRs发生率（5.06%）高于男性（2.71%）（χ²=19.86, P＜0.05），46岁以上人群ITRs发生率(5.18%)高于5至45岁人群(1.87%)（χ²=37.07， P＜0.05）。215例ITRs结果标本中1例（0.47%）为过高Nil值、214例（99.53%）为低Mitogen值所造成。经过复查，201例（93.49%）仍为不确定，14例（6.51%）变为确定结果。复查为确定结果组首次检测的Mitogen-Nil的IFN-γ浓度（中位浓度0.40 IU/mL）大于ITRs组（中位浓度0.18 IU/mL）(Z=-4.56，P＜0.05)。 结论：体检人群中QFT-GIT检测ITRs发生率低，女性高于男性，46岁以上人群高于5~45岁人群，主要原因是低Mitogen值。

摘要:摘要：目的：对南京诺尔曼公司降钙素原（PCT）定量检测系统进行用于临床检测前的性能验证。 方法：收集临床标本，验证批内和总不精密度、分析测量范围、检测限、临床常见干扰物干扰性能指标，是否符合实验室质量目标或产品说明书要求，并与已得到认可的检测系统进行比对，同时进行参考区间的初步验证。 结果：高、中和低浓度PCT样品的批内不精密度分别为5.75%、2.79%和1.50%，总不精密度分别为6.10%、4.22%和1.67%；分析测量范围高限至少达到90.27 ng/mL；检测限为0.018 ng/mL；可抵抗类风湿因子(RF)1 380 U/L、胆红素（T-Bil）600 μmol/L、溶血（Hb 10g/L）和脂肪乳(TG 20 g/L)的干扰；与Roche检测系统比对相关系数r=0.998，回归方程：Y＝0.994X+0.018，医学决定水平浓度（Xc=0.5、2和10 ng/mL）的偏移可以接受（实验室质量目标PCT最大允许偏移为10%）；20例无感染的健康体检者结果均在正常参考区间范围内。 结论：该PCT检测系统能抗常见干扰物的干扰，其精密度、正确度、分析测量范围、检测限和正常参考区间符合实验室质量要求，可用于临床样本常规检测。

摘要: