摘要:摘要：目的：对肌氨酸氧化酶法检测尿肌氨酸进行方法学性能评价，初步估计尿肌氨酸的生物参考值。 方法：参考CLSI EP5-A2、EP17-A、EP6-A、C28-A3等文件，评价肌氨酸氧化酶法检测尿肌氨酸的重复性、空白限（limits of blank，LoB）、检测限（limits of detection，LoD）、定量限（limits of quantitation，LoQ）、线性范围、回收率和生物参考值。 结果：肌氨酸氧化酶法检测2.0 μmol/L肌氨酸溶液、2.9 μmol/L新鲜尿液样本，总不精密度均＜14.0%；肌氨酸氧化酶法检测5.0、10.0 μmol/L肌氨酸溶液及6.4 、9.8 μmol/L新鲜尿液样本，总不精密度均＜10.0%。肌氨酸氧化酶法检测尿肌氨酸的LoB约为0.35 μmol/L；肌氨酸溶液的LoD、LoQ分别为1.1、1.9 μmol/L，新鲜尿样本分别为1.2、2.0 μmol/L；线性范围为2.0~125.6 μmol/L；回收率为65.3%~90.5%。健康人群尿肌氨酸的生物参考值为0.01~0.06 μmol/g肌酐。 结论：肌氨酸氧化酶方法检测尿肌氨酸的精密度、检测限、线性范围等可满足临床实验室的要求，但仍需在校准品基质方面有所改进以提高准确度。

摘要:摘要：目的：初步探讨孕妇血浆游离DNA高通量测序用于产前胎儿性染色体非整倍体检测的效果及临床可行性。 方法：2011年至2012年收集早、中孕期单胎孕妇5 540例，在知情同意的原则下采集外周血血浆进行游离DNA的高通量测序检测，通过生物信息学分析，获得测序结果；对测序检出的性染色体非整倍体患者行羊水穿刺，进行染色体G显带分析。 结果：5 540例样本中测序方法共检出10例性染色体非整倍体，其中6例与G带核型分析结果一致，包括3例45，X，1例47，XXY，2例47，XYY，其余4例G带核型正常。 结论：孕母血浆游离DNA高通量测序可对性染色体非整倍体胎儿进行无创性产前检测，但存在假阳性，还需进一步完善实验方案以提高检测效果。

摘要:摘要：目的：建立针对麻疹病毒、风疹病毒和腮腺炎病毒的多重RT-PCR 检测方法。 方法：分别根据麻疹病毒M基因、风疹病毒E基因和腮腺炎病毒M基因设计3 对引物，建立同时检测3种病毒的多重RT-CR，并评估其灵敏度和特异性。 结果：建立的多重RT-PCR可同时或分别扩增的3种病毒的111 bp、352 bp和274 bp基因片段，其灵敏度分别达到2.1、2.1、2.2 lg_{CCID 50}/mL；而与脊髓灰质炎病毒和乙型脑炎病毒无交叉反应。 结论: 建立的多重RT-PCR可用于麻疹病毒、风疹病毒和腮腺炎病毒的快速检测。

摘要:摘要：目的：建立同时检测西尼罗病毒（WNV）、基孔肯雅病毒（CHIKV）的双重荧光定量PCR法，为临床疑似病例的诊断提供依据。 方法：分别针对WNV CAP基因、CHIKV E1基因保守区设计特异性引物和TaqMan探针，建立并优化双重荧光定量PCR反应体系，评价方法的特异性和灵敏度。 结果：建立的双重荧光定量PCR可同时检测WNV、CHIKV核酸，标准曲线相关系数（r）分别达0.999、0.998，灵敏度达10 copies/μL，具有良好的特异性。 结论：建立了同时检测WNV、CHIKV的双重荧光定量PCR法，但尚需临床进一步验证。

摘要:摘要：目的：通过高分辨率熔解曲线(HRM)技术检测IL-6及其受体基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)，探讨IL-6及其受体基因SNP与冠心病(CHD)的相关性。 方法：用HRM曲线技术检测231例CHD患者和275例健康人IL-6及其受体基因6个SNP位点（IL-6-572C/G、IL-6-597A/G、IL-6-174C/G、IL-6-R-183A/G、IL-6-R-exon1C/A和IL-6-R-exon2A/T），分析其与CHD的相关性。 结果：CHD组和健康人对照组IL-6-572C/G、IL-6-597A/G、IL-6-R-exon1C/A和IL-6-R-exon2A/T基因频率、基因型频率差异有统计学意义(P均＜0.05)。IL-6-572CC、IL-6-597GA和IL-6-R-exon2AT基因型能增加发生CHD的风险（OR值分别为1.935、2.651、1.809）；IL-6-R-exon1CC基因型能降低CHD的发生风险（OR=0.514）。 结论：IL-6-572C/G、IL-6-597A/G、IL-6-R-exon1C/A和IL-6-R-exon2A/T与西北地区人群CHD易感性相关。

摘要:摘要：目的：探讨细胞周期素H（CCN H)在食管癌中的表达及临床意义。 方法：用western blot检测8例配对的食管癌和癌旁组织中CCN H蛋白表达水平；免疫组化检测98例食管癌石蜡切片中CCN H蛋白表达情况；Kaplan-meier生存曲线分析患者的生存率；Cox模型多因素分析CCN H的表达与患者临床预后的相关性。 结果：western blot结果表明，CCN H在食管癌细胞核中的表达显著高于癌旁组织（P<0.05）；免疫组化结果表明，CCN H在低分化的食管癌细胞核中表达较高，且与分化程度有关（χ²=25.10，P<0.05）；生存曲线分析显示，CCN H高表达与食管癌患者生存率相关（χ²=11.61，P＜0.05），但CCN H不能作为独立的食管癌预后指标（P>0.05）。 结论：CCN H在食管癌中表达上调，且与食管癌的发生、发展密切相关。

摘要:摘要：目的：测定皮肌炎（DM）患者血清中的肌炎特异性抗体（MSAs），探讨MSAs在诊断DM中的价值。 方法：采集38例DM、14例多发性肌炎、20例其他结缔组织病患者（6例干燥综合征、7例SLE、4例系统性硬化症、3例类风湿关节炎）和24例健康人对照血清。用ELISA法检测患者血清中抗临床无肌病性皮肌炎-140（CADM-140）抗体、抗蛋白155/140（P155/140）抗体及抗小泛素样修饰酶（SAE）抗体，分析抗体阳性率及与患者临床表现间的关系。 结果：38例DM患者中抗CADM-140抗体阳性4例（10.5%），患者多表现发热、Gottron征、肺间质病变（ILD）及活动后气喘；抗P155/140抗体阳性4例（10.5%），患者主要表现Gottron征、Heliotrope征、ILD、吞咽困难及肿瘤；抗SAE抗体阳性3例(7.9%)，患者主要表现Gottron征、关节炎/痛及吞咽困难。3项抗体联合检测的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值及Youden指数分别为28.9%、100%、100%、68.2%和0.289。 结论：联合检测抗CADM-140抗体、抗P155/140抗体及抗SAE抗体可提高DM诊断的特异性，对于DM的鉴别诊断有重要意义。

摘要:摘要：目的：探讨强直性脊柱炎（AS）患者外周血辅助性T细胞（T_H）亚群和细胞因子的变化水平及其临床意义。 方法: 用流式细胞术分析27例AS患者及30例体检健康者外周血T_H1、T_H2和T_H17细胞亚群的比例；流式微球阵列技术(cytometric bead array, CBA)检测血清IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF、IFN-γ和IL-17A的水平。 结果：AS组T_H1和T_H17细胞的百分率显著高于健康人对照组（P均<0.01），而T_H2细胞差异无统计学意义（P>0.05）。AS患者血清IL-2、IL-6、TNF和IFN-γ表达水平也明显高于健康人对照组（P均<0.01），但IL-4、IL-10和IL-17A无显著性差异（P均>0.05）。 结论：AS患者T_H细胞亚群失衡，表现为T_H1和T_H17细胞比例及IFN-γ、TNF、IL-和IL-6水平升高。

摘要:

摘要:摘要：目的：探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）干预抗β2GPI/β2GPI复合物诱导人急性单核细胞白血病细胞系（THP-1细胞）活化的作用。 方法：用一定剂量的EGCG、脂多糖(LPS)、抗β2GPI/β2GPI复合物等不同刺激物处理THP-1细胞，实时荧光定量PCR检测细胞组织因子（TF）及肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA表达；发色底物法检测TF活性；ELISA测定TNF-α蛋白的表达。 结果：50 mg/L EGCG能抑制抗β2GPI/β2GPI复合物刺激的THP-1细胞TF mRNA和活性的表达（t值为6.97、3.89，P均<0.05），同时下调该复合物诱导的THP-1细胞TNF-α mRNA和蛋白质的表达水平（t值为3.23、4.65，P均<0.05）。结论：EGCG可干预抗β2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1细胞TF及TNF-α的表达，抑制THP 1细胞活化。

摘要:摘要：目的：探讨淮南矿区尘肺并发结核患者感染耐多药结核分枝杆菌（multiple drugs resistant Mycobacterium tuberculosis, MDR-MTB）L型异烟肼耐药基因katG突变特点。 方法：收集114株MTB菌L型临床分离株，用药敏试验鉴定MDR-MTB菌L型;抽提MDR-MTB L型和H₃₇Rv标准菌株DNA，PCR法扩增katG基因，并对katG基因的突变集中区域进行测序分析。 结果: 从114株临床分离株中检出MDR-MTB菌L型31株（27.2%），其katG基因突变率为61.3%（19/31）；主要集中在315位点碱基置换突变，以Ser315Thr为主（AGC→ACC）（48.4%，15/31），其次是315位点Ser315Asn（AGC→AAC）突变（9.7%，3/31）以及431位点Ala431Val（GCG→GTG）突变（3.2%，1/31），未发现多位点联合突变，12株（38.7%，12/31）未发现katG基因突变；随机检测的10株异烟肼敏感株未见katG基因单链构象异常。 结论：淮南矿区尘肺并发结核患者感染的MDR-MTB菌L型异烟肼耐药情况较为严重，高度保守的katG基因突变是导致异烟肼耐药的分子基础，其突变位点呈多样性。

摘要:摘要：目的：用RNA干扰（RNAi）技术抑制小鼠Fas基因表达，观察其对脑微血管内皮细胞bEnd.3增殖及FADD-FLIP-TRAF-NF-κB信号传导途径的影响, 为后续FasL低剂量兴奋效应研究提供实验基础。 方法：设计合成靶向小鼠Fas基因的小干扰RNA（siRNA）片段，用脂质体包埋转染bEnd.3细胞；CCK-8法检测细胞增殖；RT-PCR检测bEnd.3细胞FasmRNA的表达情况；western blot 检测 Fas、FADD、FLIP、TRAF蛋白表达水平。 结果：CCK-8法检测显示，Fas-siRNA组细胞增殖水平与空白对照组比较，无统计学差异（t=1.805，P＞0.05）；RT-PCR 结果表明，与空白组的Fas mRNA表达水平比较，Fas-228-、Fas-310-、Fas-427-、Fas-891-siRNA组mRNA表达水平降低，差异有统计学意义(F=123.127,P＜0.05)；western blot显示，Fas-siRNA组与空白对照组Fas蛋白表达水平比较，差异有统计学意义（t=12.101，P<0.01）；Fas-siRNA组FADD、FLIP、TRAF蛋白相对表达水平与空白对照组比较，表达均下调（t=28.315、17.563、8.903，P<0.05）。 结论：Fas-siRNA能有效封闭Fas基因的表达，抑制Fas下游信号FADD、FLIP、TRAF蛋白表达。

摘要:摘要： 以聚合酶链反应（PCR）为基础的分子检测技术具有特异性强、灵敏度高、操作简便、耗时短的特点，此技术已越来越多地应用于致病菌的临床检测。大肠埃希菌（Escherichia coli）、肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、沙门菌属（Salmonella）、志贺菌属（Shigella）等细菌是临床较为常见的致病菌，往往对患者造成严重的危害。本文主要讨论了PCR技术对以上常见致病菌检测的临床应用研究状况，并展望了应用前景。

摘要:摘要： nectin(连接蛋白)是近年来发现的一大类细胞间黏附分子，属于免疫球蛋白超家族。Nectin-4蛋白在正常乳腺组织中无表达，而在乳腺癌组织中呈高表达。Nectin-4在乳腺癌形成和发展中起重要作用，促进正常乳腺上皮细胞向恶性细胞转化，并在肿瘤形成后促进癌组织浸润及远处转移。Nectin-4可作为乳腺癌的一个新的分子标志物。

摘要:摘要： microRNA（miRNA）是一类在转录后水平调控基因表达的小分子RNA，广泛地参与了机体多种生理和病理过程，如胚胎发育、器官形成及肿瘤发生等。miRNA在糖尿病患者的肾脏、视网膜及心脏微血管病变中有异常表达。因此，miRNA可为糖尿病微血管并发症的预测、诊断及治疗提供新的思路，具有潜在的临床应用价值。

摘要:摘要：目的：探讨临床分离的因外膜蛋白突变导致的铜绿假单胞菌（Pa）碳青霉烯类耐药机制是否与药物诱导相关。 方法：在M-H平板上用亚胺培南（IPM）和美罗培南（MEM）药敏纸片分别诱导3株Pa（Pa标、Pa1和Pa2）。琼脂稀释法测定诱导前后Pa对IPM、MEM、头孢他啶和头孢吡肟4种药物的最低抑菌浓度（MIC）。改良三维试验检测诱导后产碳青霉烯酶变化。SDS-PAGE观察Pa外膜蛋白OprD的改变。PCR扩增oprD基因并进行序列分析。实时荧光定量PCR检测Pa外排系统表达情况。并对诱导耐药菌株进行稳定性分析。 结果：诱导第5天出现对IPM和MEM耐药（MIC≥8 μg/mL），且MEM诱导株对2种药物敏感性降低速度明显快于IPM诱导株。诱导株未检出耐药酶，外膜蛋白OprD出现缺失或者减少。oprD基因测序发现Pa标(I)、Pa标(M)和Pa1（M）分别在831（TGG→TGA）、1 017（TGG→TGA）和1 014（TGG→TAG）有碱基突变产生终止密码子，Pa2（I）在1 206处有新的碱基插入导致移码突变。外排基因以MexA过度表达为主，同时伴有其他外排系统的过度表达。稳定性分析发现5株诱导株的耐药表型稳定，另1株外排系统表达量呈现持续升高，导致MIC值的右移。 结论：在碳青霉烯类药物环境中，外膜蛋白OprD表达减少和基因的突变以及外排系统的过度表达是引起诱导株对IPM和MEM耐药的主要原因。此型耐药株不仅耐药表型稳定，甚至可能由于某种机制导致脱离药物后MIC值仍持续升高。

摘要:摘要：目的: 探讨人脐带间质干细胞来源的exosomes（hucMSC-Ex）对四氯化碳(CCL4)诱导的肝细胞氧化应激损伤的保护作用。 方法：将体外培养的人肝细胞系HL7702分为对照组（常规培养）、CCL4损伤组及hucMSC-Ex处理组（CCL4+hucMSC-Ex）。免疫荧光检测CM-Dil染料标记的hucMSC-Ex进入HL7702细胞的情况；免疫组织化学法分析细胞过氧化物8-羟基脱氧鸟嘌呤（8-OHdG）的表达水平；比色法检测培养上清中谷胱甘肽（GSH）和丙二醛（MDA）的含量；western blot分析P38MAPK通路的活化情况。 结果：免疫荧光结果显示，hucMSC-Ex可转移进入HL7702细胞；比色法结果表明，与对照组相比，CCL4损伤组HL7702细胞培养上清中GSH含量下降，MDA上升（P<0.01），hucMSC-Ex处理组GSH和MDA含量无显著性变化；免疫组化结果显示，与对照组相比，CCL4损伤组8-OHdG表达阳性的HL7702细胞（胞核棕黄色）数量明显增高，而hucMSC-Ex处理组阳性细胞数量无明显变化；western blot结果表明，CCL4损伤组P-P38蛋白表达水平明显上升，而hucMSC-Ex处理组P-P38蛋白表达下降，其P-P38与P38/GAPDH蛋白的灰度值较CCL4损伤组下降约2.4倍。 结论：HucMSC-Ex可减轻CCL4诱导的肝细胞过氧化损伤。

摘要:摘要：目的：了解北京市各临床实验室γ-谷氨酰基转移酶（GGT）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）及α-淀粉酶（α-AMY）常规测量系统测量结果的正确度。 方法：用北京市12家大型临床实验室GGT、CK、LDH及α-AMY常规测量系统分别测量2个活性水平的人血清基质国家二级标准物质，以标准物质“认定值±不确定度”及E_n值为标准评价测量结果的正确度。 结果: 2个活性水平的标准物质，GGT测量结果范围分别为89.5~119.3 U/L、169.6~214.3 U/L；CK测量结果范围分别为197.0~224.7 U/L、372.0~446.7 U/L；LDH测量结果范围分别为169.0~225.7 U/L、260.7~372.0 U/L；α-AMY测量结果范围分别为40.0~69.3 U/L、162.3~271.0 U/L；GGT、CK、LDH及α-AMY常规测量系统测量结果满足正确度标准要求的实验室比例分别为8%（1/12）、33%（4/12）、18%（2/11）和10%（1/9）。 结论：北京市临床实验室大部分GGT、CK、LDH及α-AMY常规测量系统测量结果的正确度不能满足量值溯源要求。

摘要:摘要：目的: 探讨危急值(CrV)确立方法并对其报告成功率进行评价。 方法：设置本实验室CrV列表，设计问卷调查征求临床医务人员意见，确定本实验室CrV；评估本实验室2009年CrV报告成功率，评价指标包括半小时CrV报告成功率和平均CrV报告时间。 结果: 确定了本实验室CrV指标、阈值21项；2009年CrV数占总测试数的2.75%（49 839/1 814 242），未使用LIS系统时半小时报告成功率为36.4%，使用第1代LIS后为63.7%，使用第2代LIS后为94.6%；使用第2代LIS后，CrV平均报告时间约为9.5 min。 结论：确立了本实验室21项CrV指标，其报告成功率明显增加。

摘要:摘要:目的：评价新开发的HBeAg时间分辨荧光免疫分析法(TrFIA）定量测定试剂在临床标本检测中的分析性能。 方法：用考核试剂（广州达瑞公司）和对照试剂（意大利DiaSorin S.p.A公司）检测对1 043例血清标本，并进行符合率、一致性、相关性等指标的统计分析。对差异样本用复核试剂（Roche公司）进行复核。 结果：1 043例标本用考核试剂与对照试剂检测结果的阳性符合率为98.8%，阴性符合率为100%，一致性检验Kappa值为0.986（P<0.05），相关系数r=0.920,P＜0.01。对7个结果不一致样本进行重复试验及复核试验结果表明，其中2个差异样本重复试验结果仍为阴性，但复核试剂结果为阳性，另5个差异样本的重复试验结果与复核试剂判定结果一致，均为阳性。 结论：新开发的试剂与临床已在使用的试剂检测相关性良好，但是在对单个样本检测时由于方法学的原因，与化学发光法比较不具有检测速度和成本的优势。

摘要:摘要：目的：了解临床分离流感嗜血杆菌（Hi）的分布及耐药情况，为临床合理使用抗菌药物、预防和控制感染提供依据。 方法：收集中南大学湘雅医院2010~2012年各类临床标本Hi分离株187株，用K-B纸片扩散法检测Hi对常用的14种抗菌药物的敏感性，用头孢硝噻吩纸片法检测产β-内酰胺酶情况。 结果：187株Hi主要分离自呼吸内科(41.17%)，以儿童（21.39%）和老年（39.57%）患者居多。冬、春两季分离率较高，分别为36.90%(69/187)和30.48%(57/187)。Hi对氨苄西林、复方磺胺甲噁唑和头孢呋辛的耐药率较高，依次为81.3%、57.2%和38.5%；对氨苄西林/舒巴坦、头孢曲松、洛美沙星、左氟氧沙星、四环素、头孢噻肟、环丙沙星和阿奇霉素敏感率均＞60%。未成年人分离株对环丙沙星、氧氟沙星、左氟氧沙星敏感率（82.35%、76.47%、97.06%）高于成人分离株（49.57%、47.89%、79.87%），χ²值分别为19.629、14.529、10.728，P均<0.05；对头孢曲松的敏感率（85.29%）低于成人分离株（94.12%），χ²=4.076，P<0.05。产β-内酰胺酶株检出率为64.17%，β-内酰胺酶阴性氨苄西林耐药(BLNAR)菌株22株。 结论: Hi对氨苄西林和复方磺胺甲噁唑耐药严重，而β-内酰胺酶抑制剂、喹诺酮类、第2、3代头孢类药物、阿奇霉素可作为优先选择药物。

摘要:摘要:目的：探讨糖代谢异常人群胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能与高半胱氨酸(Hcy)的关系。 方法：对67例糖耐量正常（NGT）者及104例糖耐量受损（IGT）、58例空腹血糖调节受损（IFG）、109例2型糖尿病（T2DM）患者，检测空腹血糖（FPG）、口服葡萄糖耐量试验（OGTT) 2 h血糖、Hcy及空腹胰岛素水平，计算稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、HOMA胰岛β细胞功能指数(HBCI)、空腹胰岛β细胞功能指数(FBCI)。 结果：与NGT、IFG组比较，IGT组HOMA-IR、HBCI、Hcy差异有统计学意义（P均<0.05）；与NGT、IFG、IGT组比较，T2DM组HOMA-IR、HBCI、FBCI、Hcy差异有统计学意义（P均＜0.05）。Hcy与HOMA-IR呈正相关（r=0.233，P<0.05），与HBCI、FBCI呈负相关（r分别为－0.354、－0.289，P均<0.05）。 结论：Hcy与葡萄糖代谢异常有相关性，可作为评价胰岛素抵抗、胰岛β细胞分泌功能受损的一项观察指标。

摘要:

摘要:摘要：目的：探讨用骨髓检验快速诊断获得性免疫缺陷综合征（AIDS）患者感染马尔尼菲青霉菌的可行性。 方法：将3例AIDS患者骨髓涂片进行瑞氏 吉姆萨染色和革兰染色;用Bactec 9120全自动血培养仪进行骨髓培养。 结果：骨髓涂片中可见吞噬网状细胞内吞噬马尔尼菲青霉菌菌体，同时骨髓增菌培养也检测出马尔尼菲青霉菌。 结论：骨髓检验可以快速、准确地检测出AIDS患者是否感染马尔尼菲青霉菌，协助临床诊断并指导用药。

摘要:摘要：目的：分析脑卒中患者血浆脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2）水平，探讨其与缺血性脑卒中（ICS）梗死面积及神经功能缺损程度的关系。 方法：测定180例ICS患者、165例出血性脑卒中（HCS）患者及105例具有脑血管危险因素者血浆Lp-PLA2水平，检测ICS患者脑梗死大小并分组，对ICS患者血浆Lp-PLA2与神经功能缺损程度评分进行相关性分析。 结果：ICS组Lp-PLA2高于HCS组、相关危险因素疾病组（P＜0.05）；ICS患者小、中、大体积梗死组Lp-PLA2水平呈递增趋势，但差异无统计学意义(H=0.372,P＞0.05）；ICS患者血浆Lp-PLA2与神经功能缺损程度评分相关，r＝0.837，P＜0.05。 结论：ICS患者血浆Lp-PLA2水平明显升高，与神经功能缺损程度相关。

摘要:

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