• 2004年第5期文章目次
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    • 继续医学教育试题(5)

      2004(5).

      摘要 (226) HTML (0) PDF 0.00 Byte (26) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • 浅谈国内支原体培养和鉴定中存在的问题

      2004(5):321-322.

      摘要 (1008) HTML (0) PDF 0.00 Byte (29) 评论 (0) 收藏

      摘要:近几年来 ,泌尿生殖道的支原体 ,即解脲脲原体(UreaplasmaUrealyticum ,Uu)和人型支原体 (M .hominis,Mh)感染 ,在国内受到了很大的重视 ,就其流行性和耐药等方面涌现了大量的文献报道。在这些报道中[1~ 5] ,支原体的分离培养和鉴定方法均存在着一些问题。其中 ,尤为突出的就是仅凭肉汤培养基颜色的变化来判断有无支原体生长 ,而不是根据它们在固体培养基上的典型菌落形态 ,这是令人疑惑不解的。我们综合国内外有关文献资料 ,就肉汤颜色变化与支原体培养阴阳性结论的问题进行探讨 ,以期得到大家的重视。1 支原体培养特性支原体是介于细…

    • 人心肌肌钙蛋白Ⅰ化学发光免疫分析方法的建立

      2004(5):323-327.

      摘要 (754) HTML (0) PDF 0.00 Byte (26) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 建立检测人心肌肌钙蛋白I(cTnI)化学发光免疫分析方法。方法 用重组cTnI免疫新西兰兔获得抗体 ,经DEAE 2 3层析和 (NH4) 2 SO4沉淀纯化后 ,用碳化二亚胺 (EDC)法标记辣根过氧化物酶 ,SephadexG 2 0 0纯化。优化鲁米诺 H2 O2 肉桂酸发光体系 ,建立了cTnI化学发光免疫分析法。用该法检测 138例正常人及病人血清标本 ,确定正常值参考范围 ,并与ELISA法比较。结果 所得抗体的滴度为 1∶80 0 0。优化后的发光体系为 :鲁米诺 (4 .5mmol/L) ,H2 O2 (7.5mmol/L) ,四苯硼钠 (0 .8mmol/L) ,肉桂酸 (0 .4mmol/L) ,比单独用肉桂酸或四苯硼钠作增强剂灵敏度分别增加了 1.19和 1.0 5倍。本法检测灵敏度为0 .2ng/ml,线性范围为 0 .4~ 5 0ng/ml,批内CV平均 9.0 % ,批间CV平均 11.8% ,回收率为 10 4 .2 %。Hb浓度在 0~ 5 0nmol/L ,T Bil在 0~ 15 μmol/L ,TG在 0~ 2 .0mmol/L对测定结果无影响。与ELISA比较 ,两法结果一致 (P >0 0 5 ) ,相关系数r=0 .985 2(P <0 .0 1)。用BioCheck标准品为校正物 ,确定临床诊断参考范围为 <2 .12ng/ml,诊断符合率为 96 .2 %。结论 建立的cTnI化学发光免疫分析法可常规用于临床检验。

    • 过氧化物酶染色鉴别尿细胞管型

      2004(5):327-327.

      摘要 (500) HTML (0) PDF 0.00 Byte (27) 评论 (0) 收藏

      摘要:由于管型中各种细胞常发生不同程度的变性 ,在光学显微镜下正确鉴别常常比较困难 ,我们采用过氧化物酶染色方法可较好地鉴别管型中的细胞成分[1 2 ] 。1 材料和方法1.1 标本来源 本院肾内科确诊的 32例各种泌尿系统疾病患者的晨尿并经显微镜检查见尿中有细胞管型者。1.2 试

    • 人雌激素和孕激素受体的流式细胞术检测及几种不同抗体的应用

      2004(5):328-331.

      摘要 (565) HTML (0) PDF 0.00 Byte (25) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 建立人类雌激素受体 (ER)和孕激素受体 (PR)的流式细胞术检测方法 ,并比较几种不同抗体的应用情况。方法将乳腺癌细胞株MCF 7、T 4 7d用不同方法固定处理 ,比较它们与抗体特异性结合的差异 ,挑选最佳细胞固定方法。同时 ,以与MDA MB 2 31(MM2 31)细胞反应阳性率不大于 5 %为标准 ,对不同浓度的ER抗体 1D5和MA1 310、PR抗体 1A6和PgR6 36的反应特异性进行分析比较 ,并用于临床样本的检测。结果 经 0 .2 5 %多聚甲醛 (PFA)预固定、75 %乙醇固定、核分离液处理后的细胞 ,与抗体特异性反应的荧光强度最大 ;在 1~ 4 μg/ 10 0 μl浓度范围内 ,1D5与MM2 31反应阳性率低于 5 % ,与MCF 7反应阳性率大于 95 %。同浓度的MA1 310与MM2 31和MCF 7反应时的阳性细胞率相当 ;1A6 1∶10 0稀释 ,PgR6 36 1∶10~ 1∶2 0 0稀释 ,与MM2 31反应阳性率低于 5 % ,与T 4 7d反应阳性率大于 95 % ;用 1D5 (2 μg)、1A6和PgR6 36 (1∶10 0 )对 12例临床乳腺癌样本ER、PR检测结果分别为 (6 4 .36± 2 7.92 ) %、(5 3.95± 2 8.17) %和 (5 5 .6 3± 2 6 .93) %。结论 细胞经 0 .2 5 %PFA预固定、75 %乙醇固定、核分离液处理后 ,用一定浓度范围的 1D5、1A6和PgR6 36可分别对ER、PR进行流式细胞术定量检测。本研究方法可用于

    • GGT Ⅱ特异膜免疫吸附检测法的建立

      2004(5):332-334.

      摘要 (415) HTML (0) PDF 0.00 Byte (20) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 使用特异性抗体和植物血凝素 (PHA)建立γ 谷氨酰转肽酶同功酶Ⅱ (γ glutamyltranspeptidaseisoenzymesⅡ ,GGTⅡ )特异膜免疫吸附检测法 ,探讨其对肝细胞癌 (HCC)的临床价值。方法 从HCC患者血清中提取、分离、纯化GGTⅡ ,经神经氨酸酶 (NMD)消化后 ,制备GGTⅡ特异性抗体 ,将纯化的特异性抗体 (anti GGTⅡ )、NMD和PHA吸附并固定到硝酸纤维素膜上 ,对HCC及其相关疾病患者血清中GGTⅡ进行定性检测。结果 本法检测HCC阳性率达 86 .6 % ,特异性为 95 .7% ;对直径小于5cm的HCC检测阳性率达 6 0 .6 % ,对AFP阴性或低浓度的HCC患者检测阳性率为 6 6 .2 %。结论 GGTⅡ特异膜免疫吸附检测法可作为AFP的补充用于HCC的辅助诊断和早期发现。有简便快速、微量灵敏和价格低廉的特点。

    • 放射土壤杆菌致泌尿系感染1例

      2004(5):334-334.

      摘要 (558) HTML (0) PDF 0.00 Byte (23) 评论 (0) 收藏

      摘要:从 1例 88岁男性、急性泌尿系感染患者尿中 ,连续两次培养出放射土壤杆菌 ,报道如下。1 细菌生物学特性 接种羊血平板 35℃过夜 ,生长菌落呈针尖状 ,透明、湿润、光滑、边缘整齐 ,不溶血。原划线处菌苔呈水滴状 ,4 8h后菌落中等大小 ,麦康凯和尿定位平板上菌落生长良好。2 生化反应 经生物梅里埃公司ATBExpression32GN鉴定为放射土壤杆菌 (Agrobacteriumradiobacter) ,编码 :0 10 16 0 6 0 0 4 0 ,%ID =99.7,T =0 .97,评价 :非常好的结果。3 药敏试验  (K B法 )英国Oxoid公司生产的MH琼脂 ,北京药品生物制品检定所生产的药敏纸…

    • 实时荧光RT-PCR检测喉鳞状细胞癌组织端粒酶逆转录酶mRNA

      2004(5):335-337.

      摘要 (839) HTML (0) PDF 0.00 Byte (26) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 建立一种实时荧光逆转录多聚酶链反应 (RT PCR) ,检测喉鳞状细胞癌组织人端粒酶逆转录酶 (hTERT)mRNA表达水平 ,并与传统的RT PCR进行比较。方法 采用TriZOL提取总RNA并将mRNA逆转录成cDNA ,然后利用TaqMan技术定量检测喉鳞状细胞癌组织hTERTmRNA。结果 实时荧光RT PCR检测癌组织的阳性率为 97.0 6 % ,癌旁组织的阳性率为 38.2 4 % ,差异显著 (χ2 =2 4 .2 5 ,P <0 .0 0 5 ) ,与癌旁组织比较 ,喉鳞状细胞癌组织hTERTmRNA表达水平平均上升 17.88倍 ;传统的RT PCR检测喉鳞状细胞癌组织和癌旁组织的阳性率分别为 73.5 3%和 11 77% ,均显著低于实时荧光RT PCR的阳性率 (P <0 .0 1)。结论 实时荧光RT PCR是检测喉癌组织hTERTmRNA水平的一种快速有效、灵敏度和特异性更高的方法 ,hTERTmRNA表达的上调可能是导致喉鳞状细胞癌发生的重要因素。

    • 从患儿中段尿中分离出1株潘氏变形杆菌

      2004(5):337-337.

      摘要 (529) HTML (0) PDF 0.00 Byte (26) 评论 (0) 收藏

      摘要:ProteusPenneri(潘氏变形杆菌 ,原称普通变形杆菌生物 1群 ) ,系临床少见分离菌 ,我们从一脊柱侧弯患儿的中段尿中分离出 1株 ,现报道如下。1 病历摘要 患儿 ,男 ,12岁 ,2 0 0 3年 5月 7日来我院就诊 ,主诉为尿痛、小便失禁 ,体温正常 ,实验室检查 :尿常规 :蛋白微量 ,隐血 (

    • 全自动酶偶联法测定腺苷脱氨酶

      2004(5):338-340.

      摘要 (474) HTML (0) PDF 0.00 Byte (25) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 建立全自动测定腺苷脱氨酶 (ADA)的酶偶联分光光度法。方法 用酶联比色法对pH值、腺苷浓度等反应条件及各种实验参数进行研究。用该法测定了 90例健康者的血清样本及 99例胸腹水的ADA活性。结果 该法最低检出限为1.7U/L ,线性范围可达 2 2 0U/L(r=0 .9989) ,批内CV为 2 9%~ 5 .4 % ,批间CV为 4 .7%~ 6 4 % ,回收率为 99.7%。胆红素 <136 .8μmol/L ,血红蛋白 <3.5g/L ,抗坏血酸 <2 84 μmol/L和三酰甘油 <9.0 3mmol/L的情况下 ,对测定结果无显著性影响。 结论 本法灵敏度高 ,线性、精密度好 ,结果准确 ,干扰少 ,且操作简便快速 ,适用于全自动生化分析仪分析。

    • 密闭式粪便标本收集管的设计与制作

      2004(5):340-340.

      摘要 (581) HTML (0) PDF 0.00 Byte (23) 评论 (0) 收藏

      摘要:我们设计与制作了一种集采样、运输、检验和保存于一体的粪便标本收集管 ,经过 2 0多个医院应用 ,得到了临床、检验工作人员和病员的充分肯定。1 设计与制作 用食品级聚乙烯为原料 ,制作形状如图 1所示。尖底管状结构 ,分为三个部件 :尖底离心管、管盖和椎状小勺。小勺固定在

    • 尿蛋白SDS-琼脂糖凝胶电泳方法建立及临床应用

      2004(5):341-343.

      摘要 (560) HTML (0) PDF 0.00 Byte (22) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 建立应用于临床的尿蛋白十二烷基硫酸钠 (SDS) 琼脂糖凝胶 (AGE)电泳方法。方法 分别对Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型 4种琼脂糖、不同的缓冲对、电压和电泳时间进行实验 ,确定最佳的分离条件 ,建立测定方法。结果 当Ⅳ型琼脂糖凝胶浓度为4 0g/L ,SDS含量为 1g/L ,在pH 7.0的AMP 咪唑 HCl缓冲体系下进行电泳 ,可以有效地将尿蛋白按分子量大小进行分离。 5 7份临床尿蛋白阳性标本电泳结果表明 ,生理性蛋白尿 2 4例 ,中、高分子蛋白尿 5例 ,小分子蛋白尿 11例和混合型蛋白尿 17例。结论 本法具有分离效果好、操作简便、灵敏度高、成本低廉等优点 ,可以将尿蛋白按分子量大小分为小分子、中分子以及混合型 ,对肾脏疾病的受损部位和损伤程度的判断具有较高的价值 ,适于基层实验室的常规开展。

    • 从痰标本中分离出1株多重耐药的支气管败血鲍特菌

      2004(5):343-343.

      摘要 (481) HTML (0) PDF 0.00 Byte (23) 评论 (0) 收藏

      摘要:20 0 3年 10月我们从 1例上呼吸道感染患者痰中分离培养出 1株多重耐药的支气管败血鲍特菌 (Bordetellabronchiseptica) ,报道如下。1 病例摘要 患者 ,女 ,4 8岁 ,2 0 0 3年 9月底曾患支气管感染 ,从痰中分离培养出肺炎克雷伯菌并对大部分抗生素敏感 ,因此选用头孢噻肟钠每 1

    • 胎儿骨髓间质干细胞与细胞因子对脐血CD34+细胞扩增作用

      2004(5):344-347.

      摘要 (600) HTML (0) PDF 0.00 Byte (28) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 探讨胎儿骨髓间质干细胞对CD34 细胞体外扩增的造血支持作用。方法 体外分离、纯化胎儿骨髓间质干细胞 ;Mini MACS免疫磁珠分选 3份脐血CD34 细胞 ;建立胎儿骨髓间质干细胞与CD34 细胞共培养体系 :第 1组为单独CD34 细胞培养 ,第 2组为胎儿骨髓间质干细胞 CD34 细胞共培养 ,第 3组为细胞因子 (干细胞因子 ,白细胞介素 3,Flt3配体 ,血小板生成素 ) CD34 细胞共培养 ,第 4组为胎儿骨髓间质干细胞 细胞因子 CD34 细胞共培养。用流式细胞仪检测不同培养时间的CD34 细胞。结果 胎儿骨髓间质干细胞表达CD2 9,CD4 4 ;免疫磁珠分选CD34 细胞的平均纯度为 97.4 % ;胎儿骨髓间质干细胞 CD34 细胞共培养 2 8d ,有核CD34 细胞仍占有核细胞的 6 .4 3% ;CD34 细胞在胎儿骨髓间质干细胞、细胞因子作用下培养 2 8d ,有核细胞总数、CD34 细胞数分别被扩增 1.6 5× 10 5倍、788倍。结论 胎儿骨髓间质干细胞可有效扩增脐血造血干 /祖细胞。

    • 淋巴瘤样丘疹患者胸水及骨髓中见大量淋巴瘤样细胞1例

      2004(5):348-348.

      摘要 (526) HTML (0) PDF 0.00 Byte (26) 评论 (0) 收藏

      摘要:1 病史摘要1 1 主诉 曾斌 ,男 ,38岁 ,2 0 0 3年 12月 11日入院 ,因全身皮肤发疹 3周 ,胸闷气急 2周而入院 ,3周前患者患“感冒” ,服药后全身出现“皮疹” ,但无明显瘙痒 ,1周后出现胸闷、气急、咳痰 ,症状逐渐加重。胸片见右侧胸腔有大量渗液。曾作胸腔抽液 4次 ,总量约 4

    • 舒巴坦单剂对鲍曼不动杆菌的体外抑菌活性研究

      2004(5):349-351.

      摘要 (695) HTML (0) PDF 0.00 Byte (27) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 探讨在 β 内酰胺类抗生素 /舒巴坦联合制剂对鲍曼不动杆菌的抑菌作用中 ,舒巴坦发挥何种作用。 方法 将舒巴坦配制成 10 μg/片和 30 μg/片 2种浓度的纸片 ,应用K B法检测舒巴坦单剂纸片以及氨苄西林 /舒巴坦、头孢哌酮 /舒巴坦对曼不动杆菌的抑菌圈直径 ,同时增加了舒巴坦分别与哌拉西林、替卡西林、头孢唑林、头孢呋辛、头孢三嗪、头孢噻肟等 6种药物组成的复合纸片。并选择菌株进行舒巴坦对鲍曼不动杆菌的最低抑菌浓度试验 ,用革兰染色法和电镜观察鲍曼不动杆菌的菌体及细胞壁的改变。结果 无论是氨苄西林 /舒巴坦、头孢哌酮 /舒巴坦还是另外 6种 β 内酰胺类药物与舒巴坦的组合制剂的抑菌圈直径与舒巴坦单剂的抑菌圈直径相比均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。革兰染色光镜下可见菌体改变为长丝状 ,电镜下可见在亚抑菌浓度时细胞壁缺失。结论 对鲍曼不动杆菌体外的抗菌试验显示 ,舒巴坦对该菌的细胞壁损伤在复合制剂中起主要作用 ,和舒巴坦与何种主药组合对 β 内酰胺酶的抑制作用无明显相关性。

    • 人-鼠嵌合抗人组织蛋白酶B抗体体外抑制组织蛋白酶B活性的试验

      2004(5):352-353.

      摘要 (506) HTML (0) PDF 0.00 Byte (22) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 体外试验人 鼠嵌合抗人组织蛋白酶B(抗CatB)抗体对CatB的抑制作用。方法 培养 1株分泌人 鼠嵌合抗人CatB抗体细胞 ,收集细胞培养上清 ,分离纯化人 鼠嵌合抗人CatB抗体 ,用于体外抑制CatB活性试验。结果 该抗体在体外能抑制CatB活性。结论 抗CatB抗体能特异结合CatB并抑制其酶活性 ,将可能用于CatB过度表达的癌症治疗。

    • 应用全自动蛋白电泳系统检查地中海贫血

      2004(5):354-355.

      摘要 (647) HTML (0) PDF 0.00 Byte (22) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 对全自动蛋白电泳系统筛查地中海贫血效果进行观察及评价。方法 用法国Sebia公司生产的HydrasysLC电泳仪进行血红蛋白电泳 ,用其配套的Hyrys扫描系统对HbA、HbA2、HbF、HbH、HbBart’s、HbCS区带进行扫描 ,得出各种血红蛋白含量 ,用pH8.6醋酸纤维薄膜电泳作HbH、HbBart’s、HbA2含量对比 ,用微量血红蛋白电泳作血红蛋白区带对比 ;用碱变试验作HbF对比。结果 测定标本 2 4 72份 ,检出β地中海贫血 173例 ;α地中海贫血 :用pH8.6醋酸纤维薄膜电泳法检出HbH 6 8例、HbBart’s2 5例 ,用全自动蛋白电泳系统电泳方法检出HbH 6 3例、HbBart’s 2 2例 ,HbCS两种方法均为 13例。结论 全自动蛋白电泳系统能很好地分辨出增高的HbA2和HbF ,对β地中海贫血检查有良好的效果 ;在α地中海贫血的检查中 ,对HbCS的检出效果较好 ,并且能作含量测定 ,但HbH区带多较淡染 ,有些标本出现HbBart’s区带浓于HbH区带的现象 ,有假阴性结果出现。

    • >实验技术
    • CRP含量在细菌凝集反应中的变化

      2004(5):355-355,357.

      摘要 (882) HTML (0) PDF 0.00 Byte (30) 评论 (0) 收藏

      摘要:CRP是一种急性期反应蛋白 ,最初因其能与肺炎链球菌细胞壁中一种非型特异的多糖 (C 多糖 )发生沉淀反应而得名。我们发现一些CRP含量高 (≥ 2 0mg/L)的血清 ,在与细菌混合可使细菌发生凝集。为了了解CRP是否参与细菌凝集过程 ,我们收集了一批CRP含量高的血清进行了研究。1 材料与方法1.1 血清 经Beckman公司Array36 0特种蛋白分析仪及配套试剂检测CRP含量≥ 2 0mg/L的血清 ,共 6 5份获自不同疾病的门诊与住院患者 ,男 4 8例 ,女 17例 ,年龄 5~ 5 7岁。1.2 仪器与试剂 Beckman公司Array36 0特种蛋白分析仪及配套的CRP、C3、…

    • 一种快速简便的SARS冠状病毒RNA提取方法

      2004(5):356-357.

      摘要 (598) HTML (0) PDF 0.00 Byte (22) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 建立快速简便的SARS冠状病毒RNA提取方法。方法 采用异硫氰酸胍 玻璃粉法提取病毒RNA ,逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测SARS冠状病毒RNA。结果  2 4例SARS患者的粪便和痰液标本同时采用异硫氰酸胍 玻璃粉法和QIAGEN公司的试剂盒提取SARS冠状病毒RNA ,其粪便标本RT PCR的阳性率分别为 83.3% (2 0 / 2 4 )和 10 0 .0 % (2 4 / 2 4 ) ;痰液标本RT PCR的阳性率分别为 16 .7% (4 / 2 4 )和 2 0 .8% (5 / 2 4 )。异硫氰酸胍 玻璃粉法RT PCR的阳性率与洗脱温度有关。结论 异硫氰酸胍 玻璃粉法提取SARS冠状病毒RNA简便、快速、经济 ,可用于临床。

    • 2种方法检测结核分枝杆菌对10种药物耐药性的比较

      2004(5):358-359.

      摘要 (603) HTML (0) PDF 0.00 Byte (21) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 探讨应用比例法检测结核分枝杆菌耐药性的可行性及可比性。方法 用比例法和绝对浓度法分别检测 2 4 0株结核分枝杆菌对异烟肼 (INH)、链霉素 (SM)、乙胺丁醇 (EMB)、利福平 (RFP)、乙硫异烟胺 (TH132 1)、对氨基水杨酸 (PAS)、丁胺卡那 (AN)、卡那霉素 (KM)、氧氟沙星 (OFLX)、卷曲霉素 (CPM)的耐药性。结果 SM、RFP、CPM、PAS、AN、KM绝对浓度法和比例法检出的耐药率无显著性差异 ,而INH、EMB、TH132 1、OFLX用比例法测试耐药率均明显高于绝对浓度法 (P <0 .0 1) ,两法药敏结果INH、SM、EMB、RFP、TH132 1、CPM、AN、KM、OFLX和PAS的符合率分别为 :81.7%、90 .8%、83.8%、97.9%、83.3%、94 .2 %、97.5 %、95 .4 %、83.3%、92 .5 %。结论 比例法和绝对浓度法耐药率的差别主要与选定的药物临界浓度有关。

    • 人线粒体肌酸激酶广泛型亚型在大肠埃希菌中的表达及抗体制备

      2004(5):360-363.

      摘要 (693) HTML (0) PDF 0.00 Byte (21) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 获得人线粒体肌酸激酶广泛型亚型 (uMtCK)的全长基因 ,在大肠埃希菌中表达 ,研制抗uMtCK多克隆抗体。方法 采用逆转录PCR从培养的肿瘤细胞 (Hela细胞 )中成功扩增出 10 6 2bp的uMtCK的基因片段 ,插入到质粒pMD18 T中 ,经酶切和测序证实为uMtCK的基因编码序列 ,再插入到质粒pQE30 ,转化大肠埃希菌 ,诱导重组质粒pQE30 uMtCK表达酶融合蛋白。经亲和层析纯化 ,并进行SDS PAGE、westernblot鉴定及酶活性测定。纯化的uMtCK蛋白免疫家兔制备抗uMtCK多抗。结果 RT PCR扩增出的片段经酶切鉴定和测序证实为uMtCK的基因 ;在大肠埃希菌M15中实现了高效、可溶性的融合表达 ,表达量约 17%。重组uMtCK具有CK样催化活性 ,表明原核表达的uMtCK具有类似于天然蛋白质的生物学活性。经免疫印迹分析 ,制备的抗uMtCK多抗适合作uMtCK的进一步分析之用。结论 人uMtCK在大肠埃希菌中实现了高效表达 ,制备了针对uMtCK的抗体。

    • 从SLE患者的血液及粪便中同时分离出鼠伤寒沙门菌

      2004(5):363-363.

      摘要 (396) HTML (0) PDF 0.00 Byte (23) 评论 (0) 收藏

      摘要:我们于 2 0 0 3年 12月从一系统性红斑狼疮 (SLE)患者血液及粪便中同时分离出鼠伤寒沙门菌 ,生化反应及药敏试验结果完全一致。报告如下。1 病历摘要 患者 ,女 ,39岁 ,因“浮肿 ,尿检异常 3年 ,发热、关节痛半年 ,加重伴皮疹 2 0余天”于 2 0 0 3年 11月 2 7日入院。查体 :体

    • >研究生园地
    • KSHV ORF73C基因原核表达产物的纯化与免疫原性分析

      2004(5):364-366.

      摘要 (662) HTML (0) PDF 0.00 Byte (23) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 纯化卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)潜伏相关核抗原(LANA)羧基端编码基因ORF73C原核表达蛋白并分析其免疫原性。方法 含重组质粒pGEX-6p-1 ORF73C(pORF73C)的宿主茵BL21经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达。用glutathiones Sepharose 4B亲和层析柱纯化表达产物后,以重组3C蛋白酶对融合蛋白进行解离,SDS-PAGE对表达及纯化产物进行鉴定。以纯化的ORF73C蛋白免疫小鼠获得抗血清,建立ELISA检测其免疫原性。结果 SDS-PAGE显示蛋白条带大小分别为49000和23000,与预期的ORF73C融合蛋白及ORF73C蛋白分子量大小一致;ELISA检测显示,抗ORF73C多抗免疫反应性高于未免疫小鼠血清2倍以上。结论 成功获得了纯化的ORF73C蛋白,经ELISA显示其有较强免疫原性。

    • 内标荧光定量PCR技术在乙型肝炎病毒定量中的应用

      2004(5):367-369.

      摘要 (880) HTML (0) PDF 0.00 Byte (28) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 建立内标荧光定量PCR技术检测乙型肝炎病毒 (HBV)DNA ,以避免PCR扩增过程中可能出现的假阴性或部分抑制。方法 在TaqMan荧光探针杂交PCR技术检测HBV载量的基础上 ,结合内标参照的方法指示PCR的扩增效率。结果本检测方法具有很好的特异性、重复性 ,检测敏感度达到 1× 10 3 copies/ml。经过对 382例乙肝患者标本测定证实 ,标志物为HBsAg( )、HBeAg( )、抗HBc( )的血清检出率为 10 0 % ,标志物为HBsAg( )、抗HBe( )、抗HBc( )的血清检出率为 72 .0 % ,与Roche试剂比较 ,两者的相关系数为 0 .987。结论 本法快速、简便、特异性好、能指示病毒感染程度。

    • 生物薄片法对不育患者血清抗精子抗体分析及其临床应用

      2004(5):370-371.

      摘要 (467) HTML (0) PDF 0.00 Byte (24) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 了解不育患者血清抗精子抗体 (AsAb)的类型及其吸附精子部位的分布情况 ,探讨AsAb定位检测在体外受精筛选中的临床应用。方法 采用德国欧蒙公司生产的生物薄片试剂盒 (间接免疫荧光法 )对来我院就诊的 16 78例不育患者血清进行AsAB检测。结果 AsAb总阳性率为 7.6 3% ;其中IgM占 4 2 .2 % ,IgG占 4 6 .1% ,两者同时存在的占 8.6 % ,IgA占 3.1% ;抗头部的(包括抗头尾部和抗头体尾部 )占 6 2 .5 % ,抗体部的未见 ,抗尾部的占 36 .7% ,抗体尾部的占 0 .8%。IgM类抗头部的 (包括抗头尾部 )占 84 .6 % ,IgG类抗尾部的占 6 5 .7% ,IgA类抗头部的占 10 0 %。结论 血清AsAb类型以IgM和IgG为主 ,吸附部位以抗头部为主 ,IgM以抗头部为主 ,而IgG以抗尾部为主 ,AsAb定位检测对体外受精治疗者的筛选有独特的价值。

    • 白血病患儿骨髓中两群不同幼稚细胞的免疫表型分析

      2004(5):372-374.

      摘要 (672) HTML (0) PDF 0.00 Byte (29) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 探讨少数白血病患儿骨髓中两群不同幼稚细胞的免疫表型特点及其性质。方法 采用多参数流式细胞术(multiparameterflowcytometry ,MCF)及CD4 5 /SSC双对数散点图设门技术分析 10例白血病患儿骨髓样本中各群细胞的抗原表达情况。结果  10例样本中均检测到两群幼稚细胞群体 ,一群构成比较高 (优势群体 ,8.5 %~ 76 .9% ) ,其中有 7例样本存在抗原的异常表达 ,包括早期、晚期抗原的非同步性表达、错位表达及抗原的缺失 ;另一群构成比较低 (0 .7%~ 13.9% ) ,所有样本均表达B淋巴细胞抗原 ,为正常的幼稚B淋巴细胞 ,其中有 3例存在抗原的非同步性表达。有 7例样本流式细胞术检测的白血病细胞 (优势群体 )构成比低于形态学结果 (P <0 .0 1)。结论 少数白血病患儿的骨髓除存在白血病细胞之外也可存在数量不等的正常幼稚B淋巴细胞 ,有时可伴有抗原的异常表达 ,需与混合白血病相鉴别。在白血病免疫分型中 ,流式细胞术对幼稚细胞的定性分析比定量分析更具有临床意义。

    • 脑转移瘤患者脑脊液半胱氨酸蛋白酶抑制剂C变化的临床意义

      2004(5):375-376.

      摘要 (427) HTML (0) PDF 0.00 Byte (23) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 探讨脑脊液半胱氨酸蛋白酶抑制剂 (cystatinC)对脑转移瘤的诊断价值。方法 采用速率散射比浊法对 2 7例脑转移瘤患者和 2 0例正常对照进行脑脊液中cystatinC、β2 微球蛋白 (β2 MG)和白蛋白 (Alb)含量测定。结果 患者组脑脊液中cystatinC浓度 [(1.2 5± 0 .4 3)mg/L]显著低于对照组 [(2 .81± 0 .77)mg/L](P <0 0 5 ) ,β2 MG浓度 [(3.18± 0 .6 7)mg/L]显著高于对照组 [(1.0 1± 0 .32 )mg/L](P <0 0 5 ) ,Alb浓度 [(32 5 .7± 4 1.5 )mg/L]显著高于对照组 [(185 .5± 2 5 .8)mg/L](P <0 0 1) ;三项检测指标的特异性无显著性差异 (P >0 0 5 ) ,cystatinC、Alb检测的敏感性均显著高于 β2 MG(P <0 0 5 ) ,cystatinC与Alb检测的敏感性无显著性差异 (P >0 0 5 )。结论 脑脊液cystatinC浓度检测对于脑转移瘤的诊断是一个较好的指标。

    • 运用EQA回报结果提高检验准确性的一点体会

      2004(5):376-376.

      摘要 (350) HTML (0) PDF 0.00 Byte (21) 评论 (0) 收藏

      摘要:在临床化学室间质评 (EQA)的回报表中 ,有一张表格将参评实验室“本次室间质评情况”作了归纳 ,给出总平均VIS、总平均PT等。在表的下方有 2个栏目要求参评实验室自己填写 ,即“不及格项目”和“不及格原因” ,并明确要求“实验室主任签字”。参评实验室如能认真执行这一规定 ,

    • 肾病综合征患儿IL-10基因表达的检测及其意义

      2004(5):377-378.

      摘要 (438) HTML (0) PDF 0.00 Byte (27) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 探讨原发性肾病综合征患儿白细胞介素 10 (interleukin 10 ,IL 10 )基因表达的变化。方法 应用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)检测原发性肾病综合征 (idiopathicnephriticsyndrome ,INS)患儿外周血单个核细胞 (PBMC)IL 10mRNA的变化。结果 INS患儿急性期IL 10mRNA较正常对照组显著升高 (P <0 0 1) ,而缓解期与正常对照组相比较无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 检测INS患儿PBMCIL 10可作为观察病情活动的一个免疫学指标。

    • 早产儿并发肺炎与5种支原体感染的关系

      2004(5):379-380.

      摘要 (435) HTML (0) PDF 0.00 Byte (24) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 了解早产儿并发肺炎与支原体 (5种 )感染的关系。方法 收集 15 1例足月产儿和 10 1例早产儿的咽拭子标本 ,应用套式聚合酶链反应检测解脲脲原体 (Uu)、肺炎支原体 (Mpn)、人型支原体 (Mh)、生殖支原体 (Mg)和发酵支原体 (Mf)等 5种支原体核酸。结果 足月产儿Uu、Mpn、Mh、Mg、Mf检出率分别为 8.6 % ,3.3% ,2 .0 % ,0 %和 0 % ;早产儿分别为 4 1.6 % ,2 1.8% ,11.9% ,4 .9%和 0 % ,Uu、Mpn、Mh、Mg 4种支原体检出率显著高于足月产儿 (P <0 .0 1)。其中 4 9例剖宫早产儿的Uu、Mpn、Mh、Mg检出率也明显高于 98例足月剖宫儿。结论 新生儿早产与Uu、Mh、Mpn、Mg等支原体感染相关。

    • 《临床检验杂志》简介

      2004(5):380-380.

      摘要 (290) HTML (0) PDF 0.00 Byte (28) 评论 (0) 收藏

      摘要:

    • HBsAg 阴性的慢性乙型肝炎患者病毒血症水平与临床的关系

      2004(5):381-382.

      摘要 (511) HTML (0) PDF 0.00 Byte (22) 评论 (0) 收藏

      摘要:HBsAg阴性的HBV感染发生率约占乙型肝炎患者的10 %~ 2 5 % [1] 。此种HBsAg阴性的HBV感染是临床不明原因慢性肝炎的常见病因[2 ] 。为探讨HBsAg阴性慢性乙型肝炎患者病毒血症水平状况及其与临床的关系 ,重叠HCV感染时的影响 ,我们对 4 4例HBsAg阴性慢性乙型肝炎患者血清HBV标志物 (HBVM)及HBVDNA含量、肝内HBcAg表达进行了检测 ,并与肝组织病理学结果比较 ,报告如下。1 对象与方法1.1 研究对象 解放军第 30 2医院住院HBsAg阴性慢性乙型肝炎患者 4 4例 ,男 37例 ,女 7例 ,年龄 2 9~ 6 7岁 ,平均 4 4 .2岁。慢性肝炎及其…

    • SARS流行前无偿献血者SARS冠状病毒抗体阳性2例

      2004(5):382-382.

      摘要 (620) HTML (0) PDF 0.00 Byte (25) 评论 (0) 收藏

      摘要:严重急性呼吸综合征 (severeacuterespiratorysyndrome ,SARS)是新发生的传染病 ,2 0 0 2年 11月中旬起在我国流行 ,迄今还存在许多未解之谜 ,包括它是否可以通过空气、飞沫、接触、血液等途径传播。国家卫生部和世界卫生组织血液安全和临床技术部 (WHO/BCT)分别于 2 0 0 3年 4

    • 脑脊液中Aβ1-42、tau蛋白及IL-6的检测在阿尔茨海默病诊断中的意义

      2004(5):383-383.

      摘要 (630) HTML (0) PDF 0.00 Byte (28) 评论 (0) 收藏

      摘要:阿尔茨海默病 (AD)及血管性痴呆 (VD)是老年期痴呆最常见的两种类型。老年斑 (SP)和神经原纤维缠结 (NFT)是AD的两大病理改变。其中 β淀粉样蛋白 (Aβ)是SP的主要成分 ,NFT与tau蛋白密切相关 ,而IL 6在AD神经中枢炎症反应中起重要作用。因此 ,脑脊液中Aβ1 42 、tau蛋白及IL 6

    • NCCLS抗菌药物敏感性试验执行标准第14版信息增刊更新内容介绍

      2004(5):384-387.

      摘要 (653) HTML (0) PDF 0.00 Byte (32) 评论 (0) 收藏

      摘要:美国临床实验室标准化委员会 (NCCLS)于 2 0 0 4年 1月推出了需氧菌抗菌药物敏感试验执行标准第 14版信息增刊(M10 0 S14 ) ,以取代M10 0 S13(见NCCLS ,Wayne ,Pennsylvania,2 0 0 4 ,2 4 (1) :1 15 9.)。下面简要介绍第 14版信息增刊主要更新内容 ,供临床微生物学实验室工作人员参考。1 革兰阴性菌的主要变化1 1 在表格的介绍中 M7“警告”表中增加“鼠疫耶尔森菌与 β 内酰胺类抗生素组合”。1 2 在抗菌药物推荐分组中 M7中增加“表 1B可能的生物恐怖病原菌在试验和报告时应考虑的抗菌药物推荐分组” ,见表 1。表 1 可能…

    • 血清IL-1 β测定用于判别自然流产

      2004(5):387-387.

      摘要 (355) HTML (0) PDF 0.00 Byte (22) 评论 (0) 收藏

      摘要:我们对IL-1β与反复自然流产(RSA)的关系进行了研究,结果如下。

    • 生化液体质控品与冻干质控品的应用比较

      2004(5):388-388.

      摘要 (759) HTML (0) PDF 0.00 Byte (32) 评论 (0) 收藏

      摘要:20 0 2年初江苏省临床检验中心向全省各级医院检验科推荐Beckman液体生化质控品作为生化室内质量控制品。我室当时使用Randox冻干质控品 ,我们对两种质控品进行回顾性比较。1 材料和方法1 1 仪器 日立 76 0 0 0 2 0全自动生化分析仪。1 2 试剂 K、Na、Cl在日立 76 0 0 0

    • 铜绿假单胞菌高活性β-内酰胺酶检测及耐药性分析

      2004(5):389-390.

      摘要 (387) HTML (0) PDF 0.00 Byte (28) 评论 (0) 收藏

      摘要:我们用改良三维法 ,检测了 14 1株铜绿假单胞菌的高产AmpC β内酰胺酶和超广谱 β内酰胺酶 (ESBLs) ,并对其耐药表型及耐药机制进行分析 ,报告如下。1 材料与方法1.1 菌株来源  2 0 0 1~ 2 0 0 3年期间从我院住院患者各类标本中分离的铜绿假单胞菌为受试菌 ,大肠埃希菌ATCC2 5 92 2为三维试验指示菌。质控菌株有肺炎克雷伯菌ATCC70 0 6 0 3(SHV 18) ,大肠埃希菌DH5a产酶工程株 3株 :包括TEM 1、SHV 1和ACT 1(质粒型AmpC酶 ) ,阴沟肠杆菌 0 2 9(野生型AmpC) ,阴沟肠杆菌 0 2 9M(持续高产型AmpC) ,阴沟肠杆菌1194EC(高度诱…

    • 脂肪酸结合蛋白在不稳定心绞痛患者病情判断中的应用

      2004(5):390-390.

      摘要 (344) HTML (0) PDF 0.00 Byte (22) 评论 (0) 收藏

      摘要:脂肪酸结合蛋白(FABP)已作为急性心肌梗死(AMI)的早期诊断指标之一。本文报告不稳定性心绞痛(UAP)患者血清中FABP的检测结果,探讨其对UAP患者预后的判断价值。

    • 重症监护病房感染的病原菌分析

      2004(5):391-392.

      摘要 (390) HTML (0) PDF 0.00 Byte (26) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 了解ICU感染的病原菌特点及耐药性 ,为临床经验性用药提供参考依据。方法 对本院住ICU的病人标本中检出的病原菌进行统计分析。结果  35 2份阳性标本中革兰阴性杆菌 14 0株占 39 8% ,其中鲍曼不动杆菌的检出率占首位(2 8 1% ) ,铜绿假单胞菌次之 (9 7% ) ;革兰阳性球菌 12 7株占 36 1% ,其中金黄色葡萄球菌的检出率占首位 (2 1 9% ) ,表皮葡萄球菌和屎肠球菌次之 (均为 6 5 % ) ;各类真菌 85株占 2 4 1%。标本来源以痰为主 (86 1% )。结论 加强ICU感染的病原菌检测非常必要 ,可指导临床合理用药。

    • 硫氰酸汞试剂对含有还原型辅酶Ⅱ尿素试剂的交叉污染分析

      2004(5):392-392.

      摘要 (519) HTML (0) PDF 0.00 Byte (25) 评论 (0) 收藏

      摘要:全自动生化分析仪存在交叉污染现象的报道较多 ,但以往报道多见于试剂成分含有高浓度测试物质 ,通过试剂针携带污染对后面的测试项目造成正误差[1 2 ] 。我们在工作中发现硫氰酸汞试剂 (测定氯离子 )对含有还原型辅酶Ⅱ的尿素试剂存在交叉污染 ,且对尿素测定造成较大负误差。现

    • PCR室间质量控制评价方法研究

      2004(5):393-394.

      摘要 (512) HTML (0) PDF 0.00 Byte (22) 评论 (0) 收藏

      摘要:由于聚合酶链反应(PCR)技术的高度敏感性和复杂性,分析标准化和质量保证已迫在眉睫。探索一种专门适用于PCR室间质量评价方案(PCR EQA方案)十分必要。

    • 尿沉渣检查的新进展

      2004(5):395-395.

      摘要 (379) HTML (0) PDF 0.00 Byte (28) 评论 (0) 收藏

      摘要:尿沉渣检查又称尿有形成分检查,由于自动化仪器的使用,去除了繁琐的离心方法,用荧光染色、流式细胞分析或高速摄影,不仅能将各种有形成分(如细胞、管型)定量,还能进一步识别各种颗粒如细菌、霉菌、结晶等,故近来称为尿颗粒分析法。由于基层医院尚未普及仪器方法,故仍应按卫生部“尿液沉渣检查标准化的建议”,使用光学显微镜、电脑及

    • >产品评介
    • Sysmex SE-9000全自动血液分析仪性能的评价

      2004(5):396-397,399.

      摘要 (572) HTML (0) PDF 0.00 Byte (28) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 对SysmexSE 90 0 0 HPC (简称SE 90 0 0 HPC)全自动血液分析仪进行系统评价。方法 以国际血液学标准化委员会 (ICSH)和美国临床实验室标准化委员会 (NCCLS)制定的评价标准对其性能进行评价 ,同时对其全血细胞计数 (CBC)的参考范围进行测定。结果 SE 90 0 0 HPC各项指标的线性良好 (r>0 .995 ) ,在室温或 4℃条件下至少可稳定 4 8h ;不精密度的CV均 <5 % ;各参数的携带污染率低 (<0 .0 1% ) ;其测定结果与ICSH推荐的参考方法及CD 16 0 0血细胞分析仪结果间相关性均较好 (r>0 .97) ;高胆红素及高血脂对CBC各参数基本无干扰 (P >0 .0 5 ) ;与手工法对 94 3例白细胞分类 (DC)结果比较 ,二者嗜中性粒细胞 (N)、淋巴细胞 (L)、嗜酸性粒细胞 (E)、单核细胞 (M)及嗜碱性粒细胞 (B)的r分别为 0 .92 2、0 .92 3、0 .85 3、0 .5 6 5和 0 .182 ;SE 90 0 0 HPC对DC的敏感性、特异性及总有效性分别为 85 .2 %、6 5 .5 %和 73.4 % ;对 2 76例DC异常标本的原始细胞及幼稚粒 /红细胞筛选的总有效性≥ 75 % ;除RBC、Hb及HCT外 ,84 3例健康成人的CBC各项指标间无性别差异 (P >0 .0 5 )。结论 SE 90 0 0 HPC各方面性能良好 ,测定CBC参数快速、准确、精密、可靠、过筛能力强 ,是一种大中型医院实验室对大批量全

    • KX-21型血液分析仪试剂的研究与应用

      2004(5):398-399.

      摘要 (682) HTML (0) PDF 0.00 Byte (23) 评论 (0) 收藏

      摘要:目的 研制适用于KX 2 1血液分析仪的配套试剂。方法 用季铵盐型表面活性剂破坏红细胞 ,进行白细胞计数与分类 ;用非氰化物还原法进行血红蛋白的测定 ;以无机盐为主体组成中性等渗稀释液 ,建立配套的KX 2 1血液分析检测试剂。结果 用自制的KX 2 1配套试剂和原装配套试剂分别检测全血样品及末梢血稀释样品各 2 0 0份 ,两套试剂所测得的红细胞 (RBC)、血红蛋白 (Hb)、平均红细胞体积 (MCV)、血小板 (PLT)、白细胞 (WBC)、白细胞分类小、中、大 (W SCR、W MCR、W LCR)等相关系数均大于 0 .95 ;全血样品的各项检测指标CV值均小于 10 %。结论 自制KX 2 1配套试剂与原装试剂可比性实验表明 ,两者结果无显著性差异 ,自配的KX 2 1配套试剂完全可以替代原装进口试剂 ,并不影响检测结果 ,还可达到节约成本的目的。

    • 2001~2003年发表于临床检验杂志反馈的获奖论文

      2004(5):F005-F005.

      摘要 (338) HTML (0) PDF 0.00 Byte (25) 评论 (0) 收藏

      摘要:一、单项或多项选择题 (答案 1~ 4个 )1 γ 谷氨酰转肽酶同功酶Ⅱ具有以下特点 (  )  A 具有胚胎蛋白特点                B 血清水平升高可用于肝细胞癌诊断  C 经神经氨酸酶作用后暴露糖基结构GlcNAcD 可自正常人血清中提取2 用SDS 琼脂糖凝胶电泳法测定尿蛋白 ,最佳实验条件是 (  )  A 配成 4 0g/L浓度的Ⅲ型琼脂糖凝胶B 选用pH7 0AMP 咪唑 HCl缓冲体系  C SDS在缓冲液中浓度为 1g/LD 缓冲液中加入适量硼酸3 美国临床实验室标准化委员会 2 0 0 4年推出的执行标准第 14版信息增刊中增加的内容有 (…

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